Tim-3表達于人外周血單個核細胞的多個細胞亞群且在類風濕關節(jié)炎.pdf

1、T細胞免疫球蛋白粘蛋白-3 (T cell immunoglobulin mucin-3，Tim-3)最初被發(fā)現為Th1細胞的特異性表面標志，目前已在小鼠和人的多個細胞亞群檢測到它的逆轉錄產物。它在T細胞活化后表達上調，通過抑制細胞因子分泌和細胞增殖來調節(jié)機體的免疫平衡。它的失調參與多種自身免疫病的發(fā)病。但這些發(fā)現絕大多數來源于動物實驗，和Tim-3逆轉錄產物的檢測。我們在前期研究中發(fā)現，類風濕關節(jié)炎（RA）患者CD4+T細胞中Tim-

2、3 mRNA的表達異常增多。本課題從蛋白水平對Tim-3在人PBMC不同細胞亞群的表達情況，以及在RA患者CD4+T細胞不同亞群的表達變化做了進一步研究。
　　 目的：觀察Tim-3在人PBMC不同細胞亞群及活化的CD4+T細胞的表達情況。觀察Tim-3在RA患者外周血CD4+T細胞不同亞群的表達變化。探討Tim-3與CD4＋T細胞功能的關系，及其在RA發(fā)病中的作用。
　　 方法：FACS檢測6例健康人外周血CD4＋T細

3、胞、CD8＋T細胞、CD19＋B細胞、CD14＋單核細胞、CD3－CD56＋NK細胞上Tim-3的表達。MACS分選7例健康人和7例RA患者外周血CD4+T細胞，PMA、Ionomycin多克隆刺激體外培養(yǎng)48h，FACS檢測Tim-3和Th1型細胞因子IFN-γ、Th2型細胞因子IL-4的表達。
　　 結果：⑴Tim-3在人PBMC多個細胞亞群的表達：在人外周血淋巴細胞中，Tim-3＋細胞主要為NK細胞，其次為CD8+T細胞和

4、CD4+T細胞；除CD4+T細胞（1.03%±0. 54%）外，CD8+T細胞(1.58%±0. 47%）、NK細胞(11.00%±4.10%)、單核細胞（21.51%±7.99%)中均有一定比例的細胞表達Tim-3；其中單核細胞表達Tim-3的比例較其它亞群高（21.51%±7.99% vs 1.03%±0. 54%，1.58%±0. 47%，11.00%±4.10%，P＜0.05）。⑵Tim-3在人外周血CD4+T細胞的表達：CD4

5、＋T細胞經非特異刺激活化后，表達Tim-3的比例升高(2.27%±0.62% vs 1.03%±0.54%，P<0.05)；人外周血CD4+T細胞中，Tim-3＋細胞僅有17.34%±9.06%為Th1細胞，1.26%±2.18%為Th2細胞，提示CD4+T細胞的其它亞群可能表達Tim-3；活化的CD4+T細胞中，IFN-γ＋細胞表達Tim-3的比例較IFN-γ-細胞高(7.67%±4.63% vs 2.08%±0.69%，P<0.01

6、)。⑶Tim-3在RA患者外周血CD4＋T細胞的表達變化：RA患者CD4＋T細胞表達Tim-3的比例較對照組升高（5. 34%±3.83% vs 0.62%±0.69%，P<0.01）；RA患者Th1細胞表達Tim-3的比例較對照組升高（17.74%±9.40% vs 7.67%±4.63%，P<0.01）；RA患者Tim-3+IFN-γ-CD4+T細胞表達Tim-3的量較對照組減少（1602.71±843.67 vs 3777.14±

7、2399.37，P<0.05）。
　　 結論：除CD4+T細胞，Tim-3可表達于人PBMC的多個細胞亞群，包括單核細胞、NK細胞、CD8+T細胞等。單核細胞中Tim-3＋細胞比例較其它亞群高；除Th1細胞，Tim-3可能表達于CD4+T細胞中我們未檢測到的其它亞群。CD4+T細胞活化后Tim-3＋細胞比例升高，其中IFN-γ＋細胞中表達Tim-3的比例高于IFN-γ-細胞，提示Tim-3的表達可能與CD4+T細胞的功能，特別是