組蛋白去乙?；敢种苿┡c順鉑聯(lián)用對口腔鱗癌細胞作用的體外研究.pdf

1、研究背景：以順鉑為代表的鉑類化合物由于其顯著的抗瘤效應(yīng)，是治療口腔鱗狀細胞癌(oral squamous cell carcinoma，OSCC)最常用的一類化療藥物。為克服臨床上越來越多的病人對順鉑產(chǎn)生的耐藥性及減輕由于用藥劑量所導(dǎo)致的毒副反應(yīng)，以順鉑為核心的聯(lián)合用藥方案是目前口腔腫瘤防治領(lǐng)域的研究熱點和難點。 研究目的：本課題首次嘗試將新的抗瘤藥物，即組蛋白去乙酰化酶抑制劑(histone deacetylase inhib

2、itors，HDACIs)與順鉑進行聯(lián)合配伍，探索二者聯(lián)用應(yīng)用于口腔鱗癌治療的可能性，特別是觀察HDACIs與順鉑聯(lián)合應(yīng)用作用于口腔鱗癌細胞后，是否能增強藥物在體外的抗瘤效應(yīng)，并初步探討二者聯(lián)用作用于口腔鱗癌細胞的分子機制。 研究方法：以口腔鱗癌細胞Tca8113及KB為研究對象： (1)采用MTS比色實驗研究HDACIs及順鉑單獨作用于口腔鱗癌細胞后，對其生長增殖的抑制作用，獲得口腔鱗癌細胞對單獨使用兩種藥物的劑量反應(yīng)

3、； (2)采用westem blotting的方法觀察HDACIs作用于口腔鱗癌細胞后，對細胞組蛋白乙?；降挠绊?； (3)結(jié)合前面1，2所得實驗結(jié)果，采用低劑量的HDACIs及順鉑進行聯(lián)用，運用MTS及克隆形成實驗檢測藥物對口腔鱗癌細胞的毒性作用； (4)采用流式細胞術(shù)(flow cytometry,FCM)及TLJNEL(terminal deoxynucleotidyltransferase dUTP n

4、ick end labeling)檢測低劑量的HDACIs與順鉑配伍后是否能誘導(dǎo)口腔鱗癌細胞發(fā)生凋亡，并與單獨運用這兩種藥物的細胞相比較； (5)采用westem blotting的方法檢測低劑量的HDACIs與順鉑聯(lián)合應(yīng)用對以p53為中心的細胞信號通路的影響。 研究結(jié)果：兩株口腔鱗癌細胞都對HDACIs及順鉑呈現(xiàn)出較好的敏感性并且HDACIs可以迅速導(dǎo)致Tca8113及KB細胞組蛋白乙?；降奶岣?；與單獨運用低劑量的

5、兩種藥物比較，低劑量的HDACIs及順鉑聯(lián)用可以使兩種藥物的細胞毒性作用顯著增強(P<0.05)，并明顯誘導(dǎo)口腔鱗癌細胞發(fā)生凋亡(P<0.05)；兩種藥物進行低劑量的聯(lián)用后，可以誘導(dǎo)p53的表達，活化其下游信號分子BID，細胞色素C(Cytochrome C)從線粒體釋放到胞漿中并導(dǎo)致凋亡效應(yīng)分子CaspaSe 3發(fā)生裂解。 結(jié)論：HDACIs可以有效增強口腔鱗癌細胞對低劑量順鉑的敏感性，在體外實驗中呈現(xiàn)了較好的抗癌效應(yīng)；同時H