白靈側(cè)耳栽培菌株的不親和性因子和rDNA-IGS2序列分析.pdf

1、本研究以白靈側(cè)耳(Pleurotusnebrodensis)5個(gè)栽培菌株和1個(gè)野生菌株為材料，應(yīng)用原生質(zhì)體單核化技術(shù)獲得原生質(zhì)體單核體，通過菌株間單核體雜交進(jìn)行不親和性因子分析；通過菌株內(nèi)擔(dān)孢子交配，進(jìn)行交配型因子次級(jí)重組機(jī)率的調(diào)查分析：應(yīng)用TA克隆法進(jìn)行rDNA-IGS2區(qū)域序列分析，探討白靈側(cè)耳栽培菌株的遺傳特性。 1.不親和性因子分析表明：6個(gè)菌株有7個(gè)不同的A因子，10個(gè)不同的B因子。A、B因子的重復(fù)頻率分別為41.7％

2、和16.7％。其中，00485菌株交配型因子為A3A4B3B4，與00488菌株的A因子相同，有一個(gè)相同的B因子B4，與00487菌株有一個(gè)相同的A因子A4，一個(gè)相同的B因子B3，與00486、00489、00491菌株A、B因子均不相同；00486菌株交配型因子為A5A7B9B10，與00487菌株有一個(gè)相同的A因子A5，與其它00485、00488、00489和00491等5個(gè)菌株的A、B因子均不相同；00487菌株交配型因子為A4

3、A5B4B5，與00488菌株有一個(gè)相同的A因子A4，與00489、00491菌株A、B因子均不相同；00488菌株交配型因子為A3A4B4B6，與00489和00491菌株的A、B因子均不相同；00489菌株交配型因子為A1A2B1B2，與00491菌株A1A6B7B8有一個(gè)相同的A因子A1，B因子均不相同。 2.對(duì)6個(gè)白靈側(cè)耳菌株的332個(gè)擔(dān)孢子單核體進(jìn)行了交配型因子的次級(jí)重組機(jī)率調(diào)查分析，其中00485菌株46個(gè)，0048

4、6菌株60個(gè)，00487菌株31個(gè)，00488菌株49個(gè)，00489菌株83個(gè)，00491菌株63個(gè)。結(jié)果表明，00485、00486、00487和0048均未出現(xiàn)次級(jí)重組體，00489和00491菌株出現(xiàn)非親本型B因子，分別占總體的7.2％和1.6％。所有菌株均未出現(xiàn)A因子重組體，表明A因子很可能僅由1個(gè)亞單位組成。 3.對(duì)00485、00486、00488和00489等4個(gè)菌株rDNA-IGS2區(qū)域進(jìn)行了TA克隆。40個(gè)陽性

5、克隆得到IGS2序列片段21個(gè)，大小在1200～3593bp。其中00485菌株得到5個(gè)，片段大小在1644～3461bp；00486菌株6個(gè)，片段大小在1200～3416bp；00488菌株7個(gè)，片段大小在1372～3461bp：00489菌株3個(gè)，片段大小在1313～3593bp。長(zhǎng)片段序列比對(duì)表明多數(shù)區(qū)域一致度較高，僅在300bp和2000～2500bp區(qū)域存在差異。DNAStar軟件對(duì)長(zhǎng)片段12bp以上重復(fù)序列尋找分析表明，IG