2023年全國碩士研究生考試考研英語一試題真題(含答案詳解+作文范文)_第1頁
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文檔簡介

1、煙草花葉病毒(tobacco mosaic virus,TMV)是一種桿狀的正義RNA病毒。野生型TMV可以系統(tǒng)地感染敏感煙草N.tabacm cv. Samsun nn并產(chǎn)生典型的花葉癥狀。然而,TMV外殼蛋白(coat protein,CP)末端融合外源小肽所構(gòu)建的許多重組病毒中,如TMVFN20、TMVSc1754等能在Samsun nn的接種葉上引發(fā)類似于抗性煙草上的枯斑反應(yīng)。 本實驗室前期實驗證明TMVFN20在敏感煙

2、草上引發(fā)的枯斑反應(yīng)是過敏性反應(yīng)(Hypersensitlve response,HR),表明了TMVFN20能夠激活過敏性煙草的防衛(wèi)性反應(yīng)。同時也證明了HR的產(chǎn)生是重組CP在蛋白水平上引起的。為了尋找與重組CP蛋白相互作用的宿主蛋白,進(jìn)而闡明敏感煙草上HR的誘發(fā)機(jī)制,本工作通過酵母雙雜交方法用TMVFN20的外殼蛋白FN20CP作為誘餌從煙草酵母雙雜交cDNA文庫篩選與重組CP互作的蛋白因子,結(jié)果篩選得到三類陽性克隆,分別是煙草核糖體蛋

3、白小亞基S29(Nicotiana tabacum Ribosomal Protein S29,NTRps29)、內(nèi)幾丁質(zhì)酶(endochitinase)和碳酸酐酶(Carbonic Anhydrase,CA)。為了進(jìn)一步對候選蛋白因子進(jìn)行深入研究,原核表達(dá)并得到了NTRps29和endochitinase的融合蛋白,免疫家兔制備了NTRps29和endochitinase的多克隆抗體。與病原物激發(fā)子互作的蛋白因子的獲得以及對這些蛋白因

4、子的進(jìn)一步研究對闡述敏感性煙草上的這種非特異性的HR反應(yīng)機(jī)制非常關(guān)鍵。 與TMVFN20不同,TMVSc1754是融合有含跨膜區(qū)小肽的重組病毒,而且與TMVFN20在敏感煙草上引發(fā)的枯斑在表型上有差異,因此我們又以TMVSc1754為例來研究重組病毒在敏感煙草上引發(fā)的枯斑反應(yīng)。前期實驗結(jié)果顯示當(dāng)TMVSc1754侵染敏感煙草Samsun nn時,防衛(wèi)反應(yīng)相關(guān)基因,如HIN1和HRS203J,以及PR1a和PR1b等的表達(dá)強(qiáng)烈上調(diào)

5、,也證明了精胺(Spermine,Spm)信號通路參與了TMVSc1754誘導(dǎo)的敏感煙草上的枯斑反應(yīng)。本部分工作首先通過枯斑組織代謝物的檢測,說明了TMVSc1754引發(fā)的這種枯斑與抗性煙草上的HR枯斑類似,進(jìn)一步說明TMVSc1754引發(fā)的敏感煙草上的枯斑反應(yīng)是HR。 其次,TMVSc1754侵染敏感煙草時,Spm合成途徑的關(guān)鍵酶ODC和SAMDC的表達(dá)強(qiáng)烈上調(diào)說明在TMVSc1754誘發(fā)HR枯斑過程中,Spm在體內(nèi)大量積累,

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