PTEN、E-cadherin和CD44v6表達(dá)與食管癌浸潤(rùn)轉(zhuǎn)移關(guān)系的研究.pdf

1、目的:食管癌是我國(guó)常見的惡性腫瘤，在全國(guó)惡性腫瘤死亡總數(shù)中占22.34％，僅次于胃癌，具第二位，死亡率河南省林州市居全國(guó)之首。食管癌的發(fā)生、發(fā)展和浸潤(rùn)轉(zhuǎn)移是一個(gè)多因素、多階段和多基因改變的連貫過程，其擴(kuò)散和轉(zhuǎn)移是影響患者生存時(shí)間和質(zhì)量的主要因素之一，目前對(duì)這一過程的研究主要集中在細(xì)胞與細(xì)胞間粘附功能的喪失和惡性腫瘤細(xì)胞突破基底膜向遠(yuǎn)處游走的過程及相關(guān)因素上。 與張力蛋白同源10號(hào)染色體缺失的磷酸酶基因(phosphatase a

2、nd tensinhomology deleted on chromosome 10，PTEN)是迄今為止發(fā)現(xiàn)的第一個(gè)具有雙重特異磷酸酶活性的抑癌基因，該基因的突變或缺失與人類許多腫瘤有關(guān)。 E鈣粘蛋白(E-cadherin，E-cad)和CD44v6均為介導(dǎo)細(xì)胞與細(xì)胞、細(xì)胞與基質(zhì)間相互作用的粘附分子，E-cadherin主要介導(dǎo)同型細(xì)胞的粘附功能，其表達(dá)下降或缺失時(shí)細(xì)胞間的相互粘附力下降，造成細(xì)胞容易分散而向外周浸潤(rùn)性生長(zhǎng)，一

3、旦獲得轉(zhuǎn)移的必要條件，就可脫離原發(fā)病灶而發(fā)生轉(zhuǎn)移，這已在對(duì)甲狀腺乳頭狀癌、膀胱癌、前列腺癌和膽囊癌等的研究中得到證實(shí)。 CD44v6使細(xì)胞與細(xì)胞之間的粘附作用發(fā)生改變，賦予腫瘤浸潤(rùn)生長(zhǎng)和轉(zhuǎn)移的能力。CD44v6促進(jìn)轉(zhuǎn)移的作用機(jī)制可能是表達(dá)CD44v6的腫瘤細(xì)胞與淋巴管或血管內(nèi)某一配體結(jié)合，使轉(zhuǎn)移到那里的腫瘤細(xì)胞可以更加穩(wěn)定地寄宿與生長(zhǎng)，從而有效地形成轉(zhuǎn)移。近年來(lái)的研究證實(shí)，CD44v6的過量表達(dá)與乳腺癌、胃癌、食管癌等腫瘤的發(fā)生

4、、發(fā)展和浸潤(rùn)轉(zhuǎn)移密切相關(guān)。 在惡性腫瘤發(fā)生機(jī)制的癌基因研究中，許多學(xué)者提出了基因協(xié)同作用假說，認(rèn)為在惡性腫瘤發(fā)生、發(fā)展和浸潤(rùn)轉(zhuǎn)移的過程中，至少有兩個(gè)或兩個(gè)以上功能不同的異常激活的基因各自發(fā)揮不同作用，并在時(shí)間及空間上相互配合，協(xié)同促進(jìn)了細(xì)胞的癌變。食管癌的發(fā)生發(fā)展是多因素的，目前雖然對(duì)其發(fā)生發(fā)展的相關(guān)因素分別有較多的研究，但多因素在食管癌浸潤(rùn)轉(zhuǎn)移的協(xié)同作用及其相互之間關(guān)系的研究還不多。為進(jìn)一步探討PTEN、E-cadherin和

5、CD44v6蛋白的表達(dá)與食管癌浸潤(rùn)轉(zhuǎn)移的關(guān)系，尋求早期檢測(cè)食管癌發(fā)生、發(fā)展和浸潤(rùn)轉(zhuǎn)移的指標(biāo)及尋找抑制食管癌浸潤(rùn)轉(zhuǎn)移的有效方法，本文采用免疫組織化學(xué)SP法檢測(cè)了39例高發(fā)區(qū)食管鱗癌組織、23例癌旁不典型增生組織和39例食管正常粘膜組織中PTEN、E-cadtlerin和CD44v6的表達(dá)情況，探討它們?cè)谑彻馨┑陌l(fā)生、發(fā)展和浸潤(rùn)轉(zhuǎn)移過程中是否具有協(xié)同作用，并探討它們相互之間的關(guān)系及作用機(jī)制，為進(jìn)一步探討食管癌浸潤(rùn)轉(zhuǎn)移機(jī)制及對(duì)其實(shí)施阻斷治療提

6、供理論基礎(chǔ)。 方法: 1．采用免疫組織化學(xué)SP法分別檢測(cè)39例食管鱗癌、癌旁不典型增生組織及其相應(yīng)的正常食管粘膜組織中PTEN、E-cadherin和CD44v6蛋白的表達(dá)水平。分析三者在食管鱗癌不同分化程度、不同浸潤(rùn)程度及有無(wú)淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移時(shí)的癌組織中表達(dá)的差異性及其相關(guān)性。 2．統(tǒng)計(jì)學(xué)方法：應(yīng)用SPSS10.0統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)處理。計(jì)數(shù)資料采用x。檢驗(yàn)、相關(guān)性檢驗(yàn)用Spearman相關(guān)分析，以α=0.05為顯

7、著性檢驗(yàn)水平。 結(jié)果: 1.39例食管正常粘膜組織PTEN蛋白陽(yáng)性表達(dá)率為100％(39/39)，明顯高于癌組織中的64.10％(25/39，P(0.01)，而與非典型增生組織的86.96％(20/23)相比無(wú)明顯差異(P>0.05)。且其陽(yáng)性表達(dá)率隨食管鱗癌分化程度的降低而降低，隨淋巴結(jié)的轉(zhuǎn)移而降低，差異有顯著性(P(0.05)。 2．在食管正常粘膜組織E-cadtlerin蛋白陽(yáng)性表達(dá)率82.05％(32/3

8、9)，在非典型增生組織陽(yáng)性表達(dá)率73.91％(17/23)，而在癌組織陽(yáng)性表達(dá)率只有46.15％(18/39)，在食管癌組織的陽(yáng)性表達(dá)水平明顯低于正常組織(P<0.01)。E-cadherin的陽(yáng)性表達(dá)率隨著食管鱗癌分化程度的降低而降低，隨著淋巴結(jié)的轉(zhuǎn)移而降低，差異有顯著性(P<0.05)。 3、CD44v6蛋白在39例食管正常粘膜組織陽(yáng)性表達(dá)率只有30.77％(12/39)，在非典型增生組織陽(yáng)性表達(dá)率56.52％(13/23)

9、，而在癌組織陽(yáng)性表達(dá)率為76.92％(30/39)。且其陽(yáng)性表達(dá)率隨著腫瘤分化程度的降低而升高，隨著淋巴結(jié)的轉(zhuǎn)移而升高，差異有顯著性(P<0.05)。 4、隨著浸潤(rùn)深度的增加，PTEN和E-cadherin的陽(yáng)性表達(dá)率都明顯降低，PTEN在癌組織浸潤(rùn)程度上的陽(yáng)性表達(dá)率從淺肌層到纖維膜依次為：83.33％(5/6)、60％(3/5)、57.14％(16/28)，三組比較有明顯差異(P<0.05)；E-cadherin依次為：66.

10、67％(4/6)、60％(3/5)、39.29％(11/28)，三組比較有明顯差異(P<0.05)：而CD44v6蛋白的陽(yáng)性表達(dá)率隨著癌細(xì)胞浸潤(rùn)深度的增加而升高，從浸肌層到食管纖維膜依次為：50％(3/6)、60％(3/5)、85.71％(24/28)，三組比較有明顯差異(P<0.05)。 5、隨著癌細(xì)胞淋巴結(jié)的轉(zhuǎn)移，PTEN和E-cadherin的陽(yáng)性表達(dá)率都明顯降低，PTEN在有淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的癌組織中陽(yáng)性表達(dá)率為46.15％(

11、6/13)，明顯低于無(wú)淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移時(shí)的73.08％(19/26)，差異有顯著性(P<0.01)；E-cadherin在有淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移時(shí)為30.76％(4/13)，明顯低于無(wú)轉(zhuǎn)移時(shí)的53.85％(14/26)，差異有顯著性(P<0.05)；而CD44v6蛋白的陽(yáng)性表達(dá)率隨著淋巴結(jié)的轉(zhuǎn)移而升高，在有淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移時(shí)為92.31％(12/13)，明顯高于無(wú)淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移時(shí)的69.23％(18/26)，差異有顯著性(P<0.05)。 6、E-cad

12、tlerin與PTEN的陽(yáng)性表達(dá)呈正相關(guān)(P<0.01)；PTEN和CD44v6之間表現(xiàn)為負(fù)相關(guān)(P<0.01)：E-cadherin與CD44v6之間的表達(dá)亦表現(xiàn)為負(fù)相關(guān)(P<0.01)，三者都與腫瘤的浸潤(rùn)和轉(zhuǎn)移密切相關(guān)，而與腫瘤的大小、臨床分期無(wú)關(guān)(P>0.05)。 結(jié)論: 1、PTEN的陽(yáng)性表達(dá)率在食管鱗癌組織中表達(dá)較低，并隨著分化程度的降低而降低，隨著浸潤(rùn)深度的增加而降低，隨著淋巴結(jié)的轉(zhuǎn)移而降低，提示PTEN基因

13、的失活(或缺失)及蛋白表達(dá)的下降在食管鱗癌的發(fā)生、分化及浸潤(rùn)轉(zhuǎn)移過程中起重要作用。 2. E-cadherin的陽(yáng)性表達(dá)率在食管鱗癌組織中較低，隨著癌組織分化程度的降低而降低，隨著癌組織浸潤(rùn)深度的增加而降低，隨著癌細(xì)胞淋巴結(jié)的轉(zhuǎn)移而降低，提示食管鱗癌細(xì)胞的發(fā)生、分化及浸潤(rùn)轉(zhuǎn)移可能與E-cadherin蛋白的低表達(dá)有關(guān)。 3、CD44v6的陽(yáng)性表達(dá)率從正常粘膜到非典型增生至癌組織逐漸升高，隨著癌組織分化程度的降低而升高，隨

14、著癌組織浸潤(rùn)深度的增加而升高，隨著癌細(xì)胞PTEN、E—cadherin和CD44v6表達(dá)與食管癌浸潤(rùn)轉(zhuǎn)移關(guān)系的研究淋巴結(jié)的轉(zhuǎn)移而升高，提示CD44v6蛋白的表達(dá)可能促進(jìn)了食管鱗癌細(xì)胞的生長(zhǎng)、分化和浸潤(rùn)轉(zhuǎn)移。 4．PTEN與E-cadherin陽(yáng)性表達(dá)的正相關(guān)性、與CD44v6陽(yáng)性表達(dá)的負(fù)相關(guān)性及E-cadherin和CD44v6陽(yáng)性表達(dá)的負(fù)相關(guān)性，提示多因素參與了食管鱗癌的發(fā)生、發(fā)展和浸潤(rùn)轉(zhuǎn)移。PTEN表達(dá)的異常在食管鱗癌的發(fā)生