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文檔簡介
1、目的:
構建小鼠air-pouch植骨氣囊模型,并選擇鈦顆粒所誘導的骨溶解模型,觀察在氣囊內部注射鈦離子溶液或者鈦顆?;鞈乙汉髮︹侇w粒所誘導的無菌性炎癥的程度是否具有一致性,探討鈦離子在炎性因子介導的無菌性松動致炎性過程中其具有的可能作用。
方法:
雄性昆明近交系小鼠60只,平均約8-10周齡大小,每只體重約為30g左右。20只小鼠作為氣囊植骨模型顱骨供體。取余下的40只小鼠按照隨機法分為4組,每組10只。
2、分別設定為空白對照組(A組)、鈦顆粒組(B組)、rh-VEGF組(C組)和鈦離子組(D組)。小鼠背部皮膚備皮后皮下注入無菌空氣3mL作為初始氣囊,隔日在氣囊內加注1ml無菌空氣維持,第8天無菌條件下切開氣囊并在內壁植入同源顱骨片,完成植骨氣囊模型。植骨后第一天在B、C組小鼠氣囊中注入0.5mL鈦顆粒懸液,D組注入0.5ml鈦離子溶液,A組注入0.5mL生理鹽水溶液。氣囊植骨前第6、7天及植骨后隔天,在C組小鼠氣囊內注射0.2mL的rh-
3、VEGF混懸液,A、B、D組則相應注射0.2mL的無菌生理鹽水。植骨2周后使用頸椎脫臼法處死小鼠并取囊壁以及骨片行HE染色觀察其病理學改變,免疫組化及qRT-PCR檢測炎性因子TNF-α、IL-1β、IL-6、VEGF的表達量改變。
結果:
所有小鼠均存活直至實驗完成。大體觀察發(fā)現(xiàn) A組氣囊紅腫輕,囊壁上新生血管少見。B、C、D組氣囊紅腫明顯加重,可見較多滲出及新生血管,其中C組最重,B組次之,D組介于B、C組之間。
4、組織學及分子生物學檢測表明,B組囊壁炎性反應及骨溶解反應明顯,囊壁厚度、細胞密度及TN F-α、IL-1β、IL-6、VEGF表達量較A組對照組明顯增加(P<0.05);C組囊壁炎性反應及骨溶解最為明顯,上述觀察指標均高于B組顆粒組(P<0.05);D組囊壁亦可見明顯炎性反應及輕微骨溶解,但炎性因子的表達相較于 B組而言則表達量相當或略低(P<0.05),較A組則明顯增高(P>0.05)。
結論:
鈦離子在體內可以誘
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