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1、目的:
構(gòu)建小鼠air-pouch植骨氣囊模型,并選擇鈦顆粒所誘導(dǎo)的骨溶解模型,觀察在氣囊內(nèi)部注射鈦離子溶液或者鈦顆粒混懸液后對(duì)鈦顆粒所誘導(dǎo)的無(wú)菌性炎癥的程度是否具有一致性,探討鈦離子在炎性因子介導(dǎo)的無(wú)菌性松動(dòng)致炎性過(guò)程中其具有的可能作用。
方法:
雄性昆明近交系小鼠60只,平均約8-10周齡大小,每只體重約為30g左右。20只小鼠作為氣囊植骨模型顱骨供體。取余下的40只小鼠按照隨機(jī)法分為4組,每組10只。
2、分別設(shè)定為空白對(duì)照組(A組)、鈦顆粒組(B組)、rh-VEGF組(C組)和鈦離子組(D組)。小鼠背部皮膚備皮后皮下注入無(wú)菌空氣3mL作為初始?xì)饽?,隔日在氣囊?nèi)加注1ml無(wú)菌空氣維持,第8天無(wú)菌條件下切開氣囊并在內(nèi)壁植入同源顱骨片,完成植骨氣囊模型。植骨后第一天在B、C組小鼠氣囊中注入0.5mL鈦顆粒懸液,D組注入0.5ml鈦離子溶液,A組注入0.5mL生理鹽水溶液。氣囊植骨前第6、7天及植骨后隔天,在C組小鼠氣囊內(nèi)注射0.2mL的rh-
3、VEGF混懸液,A、B、D組則相應(yīng)注射0.2mL的無(wú)菌生理鹽水。植骨2周后使用頸椎脫臼法處死小鼠并取囊壁以及骨片行HE染色觀察其病理學(xué)改變,免疫組化及qRT-PCR檢測(cè)炎性因子TNF-α、IL-1β、IL-6、VEGF的表達(dá)量改變。
結(jié)果:
所有小鼠均存活直至實(shí)驗(yàn)完成。大體觀察發(fā)現(xiàn) A組氣囊紅腫輕,囊壁上新生血管少見(jiàn)。B、C、D組氣囊紅腫明顯加重,可見(jiàn)較多滲出及新生血管,其中C組最重,B組次之,D組介于B、C組之間。
4、組織學(xué)及分子生物學(xué)檢測(cè)表明,B組囊壁炎性反應(yīng)及骨溶解反應(yīng)明顯,囊壁厚度、細(xì)胞密度及TN F-α、IL-1β、IL-6、VEGF表達(dá)量較A組對(duì)照組明顯增加(P<0.05);C組囊壁炎性反應(yīng)及骨溶解最為明顯,上述觀察指標(biāo)均高于B組顆粒組(P<0.05);D組囊壁亦可見(jiàn)明顯炎性反應(yīng)及輕微骨溶解,但炎性因子的表達(dá)相較于 B組而言則表達(dá)量相當(dāng)或略低(P<0.05),較A組則明顯增高(P>0.05)。
結(jié)論:
鈦離子在體內(nèi)可以誘
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