人參皂苷Rb1對人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞保護機制的初步研究.pdf

1、本研究分為二部分：第一部分:人參皂苷Rb1對白消安誘導(dǎo)內(nèi)皮細(xì)胞凋亡的抑制作用
　　 目的: 研究白消安誘導(dǎo)人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞(HUVEC)凋亡及人參皂苷Rb1對此作用的干預(yù)效應(yīng)。
　　 方法: 體外培養(yǎng)HUVEC，分別用不同濃度白消安刺激HUVEC 12 h，24 h，以Annexin-V-流式細(xì)胞術(shù)檢測細(xì)胞凋亡，選定合適白消安作用濃度及時間；以人參皂苷Rb1預(yù)處理30 min后，再用白消安刺激HUVEC，以流式細(xì)胞術(shù)檢測

2、凋亡。
　　 結(jié)果: 高濃度白消安（120 mg/L）可顯著誘導(dǎo)HUVEC凋亡，而人參皂苷Rb1可抑制此誘導(dǎo)凋亡作用，且不同濃度抑制作用不同。
　　 結(jié)論: 白消安誘導(dǎo)內(nèi)皮細(xì)胞凋亡可能是造血干細(xì)胞移植中內(nèi)皮損傷的重要機制之一，而人參皂苷Rb1可能通過抑制白消安誘導(dǎo)的內(nèi)皮細(xì)胞凋亡發(fā)揮內(nèi)皮細(xì)胞保護效應(yīng)。
　　 第二部分:人參皂苷Rb1對白消安致內(nèi)皮細(xì)胞表達PAI-1、TF和TGF-β1的影響
　　 目的: 研

3、究白消安對血管內(nèi)皮細(xì)胞纖溶酶原激活物抑制劑-1（PAI-1）、組織因子（TF）和轉(zhuǎn)化生長因子-β1（TGF-β1）表達的影響，以及人參皂苷Rb1對此作用的干預(yù)效應(yīng)，探討人參皂苷Rb1對內(nèi)皮細(xì)胞的保護作用機制并確定其作用的最佳濃度。
　　 方法: 體外培養(yǎng)人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞（HUVEC），分別用BU和人參皂苷Rb1干預(yù)，以RT-PCR或?qū)崟r熒光定量PCR檢測HUVEC PAI-1、TF和TGF-β1 mRNA的表達，ELISA方法檢

4、測HUVEC培養(yǎng)上清液中PAI-1、TF和TGF-β1的蛋白含量。
　　 結(jié)果: 采用不同濃度BU刺激HUVEC 24 h后檢測PAI-1和TGF-β1 mRNA的表達，發(fā)現(xiàn)60 mg/L BU使HUVEC PAI-1和TGF-β1 mRNA表達顯著增強，因此選定60 mg/L 為BU作用濃度；以人參皂苷Rb1預(yù)處理30 min后，再用BU刺激HUVEC，發(fā)現(xiàn)BU (60 mg/L)能使HUVEC PAI-1、TF和TGF-β1