脂氧素A-,4-對缺氧損傷臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞保護(hù)作用的研究.pdf

1、目的： 探討脂氧素（lipoxin，LX）對缺氧損傷的臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞（human umbilical vein endothelial cell，HUVEC）的保護(hù)作用及其機(jī)制。 方法： 體外培養(yǎng)臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞，培養(yǎng)后的細(xì)胞分別以單純M199培養(yǎng)基培養(yǎng)（對照組）、以氯化鈷（CoCl2）誘導(dǎo)細(xì)胞缺氧（缺氧組）、以不同濃度脂氧素A4（LXA4，1、10、100 nmol／L）加入缺氧細(xì)胞培養(yǎng)液中（藥物干預(yù)組）。倒置相

2、差顯微鏡下觀察各組HUVEC的形態(tài)學(xué)變化；四甲基偶氮唑藍(lán)（methylthiazoyol tetrazolium，MTT）法檢測不同濃度LXA1和100nmol／L的LXA4作用不同時(shí)間（4、8、12、24 h）對缺氧HUVEC存活率的影響；免疫細(xì)胞化學(xué)法檢測細(xì)胞胞質(zhì)內(nèi)第Ⅷ因子相關(guān)抗原抗體（von willebrand factor，vWF）水平變化，以灰度值表示；激光共聚焦顯微鏡測定細(xì)胞胞質(zhì)內(nèi)游離Ca2+濃度變化。 結(jié)果：

3、 1．細(xì)胞形態(tài)：缺氧組HUVEC明顯失去原有正常細(xì)胞形態(tài)，細(xì)胞變圓，核同縮；藥物干預(yù)組正常細(xì)胞數(shù)量增多，加入100 nmol／L濃度的LXA4后，大部分細(xì)胞形態(tài)與正常培養(yǎng)的細(xì)胞形態(tài)基本相似。 2．細(xì)胞存活率：缺氧組細(xì)胞存活率為（40．1±3．9）％，藥物干預(yù)組細(xì)胞培養(yǎng)液中加入1、10、100 nmol／L濃度的LXA4后，細(xì)胞存活率分別為（52．9±1．4）％，（64．1±3．3）％，（76．6±1．6）％，分別與缺氧組比較

4、，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0．05）。細(xì)胞培養(yǎng)液中LXA4濃度為100 nmol／L時(shí)，作用4、8、12、24 h，細(xì)胞存活率（％）分別為68．2±2．3、82．5±1．4、82．9±1．4和72．2±8．5，且在12 h時(shí)達(dá)峰值；各時(shí)間點(diǎn)細(xì)胞存活率分別與缺氧組比較，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0．05）。 3．vWF水平：隨著藥物干預(yù)組細(xì)胞培養(yǎng)液中LXA4濃度的增加，其胞質(zhì)內(nèi)vWF水平呈降低趨勢，LXA4濃度為1、10、100 n