2023年全國碩士研究生考試考研英語一試題真題(含答案詳解+作文范文)_第1頁
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文檔簡介

1、目的:研究表明,β-淀粉樣肽(Aβ)在阿爾茨海默病(AD)的發(fā)病中起著至關重要的引發(fā)及樞紐作用,但Aβ神經(jīng)毒性的分子機制迄今尚不明確。本實驗研究Aβ作用后MLK3、MKK3/6和P38MAPKs的活性(磷酸化)變化,并分析P38MAPKs及MLK3的抑制劑SB239063(SB)、K252a對Aβ誘導的細胞凋亡的影響,以闡明MLK3-MKK3/6-P38信號通路在Aβ神經(jīng)毒性中的作用;分別觀察N-甲基-D-天(門)冬氨酸(NMDA)受體

2、拮抗劑MK801及NMDA受體亞基NR2A、NR2B的抑制劑NVP-AAM077(NVP)和R025-6981(Ro)對Aβ作用下MLK3-MKK3/6-P38信號通路的活化、細胞凋亡的影響,以闡明Aβ神經(jīng)毒性條件下MLK3-MKK3/6-P38信號通路調控的分子機制,最終為AD治療藥物的開發(fā)提供新的線索。 方法:采用神經(jīng)母細胞瘤細胞SH-SY5Y,寡聚化的Aβ25-35加入培養(yǎng)基中作用不同時間;用DAPI染色法觀察細胞凋亡情況

3、;用免疫印跡方法檢測MLK3、MKK3/6和P38MAPKs的磷酸化水平改變。所有工具藥均在Aβ作用前半小時加入無血清含N2的培養(yǎng)基。 結果: 1、DAPI染色結果顯示,Aβ25-35刺激后1h,SH-SY5Y細胞的凋亡率有顯著升高,并隨作用時間的延長逐漸升高,有時間依賴性。 2、Aβ25-35引起細胞內(nèi)MLK3、MKK3/6和P38MAPKs磷酸化水平的升高,均在Aβ25-35作用6h時達到活化高峰。

4、3、P38MAPKs抑制劑SB作用于細胞后,P38MAPKs磷酸化水平降低而MLK3和MKK3/6磷酸化水平無明顯變化,DAPI染色結果顯示細胞凋亡率明顯下降。 4、MLK3抑制劑K252a作用于細胞后,MLK3、MKK3/6和P38MAPKs的磷酸化水平均下降而且細胞凋亡率降低。 5、NMDA受體拮抗劑MK801及NR2A、NR2B的抑制劑NVP和Ro分別作用于細胞,結果顯示MLK3、MKK3/6和P38MAPKs的磷

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