EGFr-TKIs治療晚期非小細胞肺癌獲得性耐藥應(yīng)對方法的探索研究.pdf

1、背景與目的：
　　非小細胞肺癌(non-small cell lung cancer，NSCLC)的發(fā)病率和死亡率位居世界首位，多數(shù)病人確診時已處于晚期，預(yù)后差，療效差，表皮生長因子受體酪氨酸激酶抑制劑(EGFR-TKIs)治療晚期非小細胞肺癌療效顯著提高，且安全性好，但最終仍會耐藥導(dǎo)致腫瘤進展。EGFR-TKIs耐藥機制復(fù)雜，應(yīng)對困難，這也是目前研究的熱點，本研究旨在探索應(yīng)對EGFR-TKIs治療晚期NSCLC獲得性耐藥的方法。

2、
　　1.研究水飛薊賓對肺癌細胞A549/H1650增殖、遷移的影響及與吉非替尼聯(lián)合應(yīng)用的協(xié)同作用，觀察水飛薊賓對A549/H1650的上皮間質(zhì)化(EMT)主要調(diào)控蛋白的作用，觀察其逆轉(zhuǎn)上皮間質(zhì)化增強吉非替尼敏感性抗耐藥的作用。
　　2.研究EGFR-TKIs治療晚期NSCLC長期獲益后獲得性耐藥的患者，化療后再次應(yīng)用EGFR-TKIs的療效。
　　3.研究厄洛替尼或吉非替尼治療晚期非小細胞肺癌獲得性耐藥后阿法替尼治療

3、效果。
　　4.探索晚期NSCLC使用?？颂婺岖@得性耐藥后加大劑量繼續(xù)治療的療效。
　　方法：
　　1.用MTT法檢測水飛薊賓、吉非替尼及兩藥聯(lián)用對A549、H1650細胞增殖的影響;用劃痕愈合試驗和Transwell遷移小室試驗檢測水飛薊賓、吉非替尼及兩藥聯(lián)用對肺癌細胞運動、遷移能力的影響。用Western Blotting試驗檢測水飛薊賓、吉非替尼及兩藥聯(lián)用對A549/H1650細胞中EMT及PI3K/AKT蛋白水

4、平表達的影響。
　　2.前瞻性對EGFR-TKIs治療晚期NSCLC長期獲益后獲得性耐藥的患者，先化療，后再次應(yīng)用EGFR-TKIs治療，依據(jù)RECIST標準評價療效，比較再使用同一種EGFR-TKI與另一種EGFR-TKI的療效。
　　3.厄洛替尼或吉非替尼治療晚期非小細胞肺癌獲得性耐藥后的患者，給予阿法替尼50mg，每日口服至疾病進展或毒副反應(yīng)不能耐受，每6周1次CT掃描作療效評價，每4周1次作健康相關(guān)的生活質(zhì)量評估。<

5、br>　　4.埃克替尼治療的晚期非小細胞肺癌獲得性耐藥后，根據(jù)病情發(fā)展快慢，采用逐片加量和逐倍加量的形式進行治療，增大的SD或腫瘤無變化但腫瘤標志物持續(xù)升高的患者采用逐片加量的形式，PD患者采用逐倍加量的形式，按RECIST1.1標準進行療效評價，按照NCI-CTC3.0標準評估不良反應(yīng)。
　　結(jié)果：
　　1.濃度為1μmol/L的吉非替尼和100μmol/L濃度的水飛薊賓對A549有一定的抑制作用，40μmol/L濃度的水

6、飛薊賓能抑制H1650的生長，二者聯(lián)合作用比單藥作用明顯增強(P＜0.05)，有明顯的濃度依賴性;在劃痕愈合試驗中，水飛薊賓和吉非替尼降低了A549/H1650細胞的運動性，并呈劑量依賴性，兩藥聯(lián)用作用更強。Western blot顯示，水飛薊賓和吉非替尼單藥處理A549和H1650細胞后，EGFR的表達降低，PI3K/AKT的表達降低，E鈣黏蛋白的表達增加，N鈣黏蛋白和波形蛋白及下游EGFR信號通路下調(diào)，兩藥聯(lián)用作用更明顯，抑制上皮間

7、質(zhì)化從而對抗EGFR-TKI耐藥。
　　2.初次使用EGFR-TKIs的中位無進展生存期為19個月，兩次應(yīng)用EGFR-TKI的間隔時間在4--15個月，13例再用同一種EGFR-TKI（同藥組），14例再用另一種EGFR-TKI（換藥組），總療效:完全緩解(CR)為1例(3.7％)，部分緩解(PR)為8例(29.6％)，穩(wěn)定(SD)為14例(51.9％)，進展(PD)為4例(14.8％)，有效率RR為33.3％，疾病控制率(DCR

8、)為85.2％(95％ CI為62-94％)，再使用EGFR-TKI的mPFS為6個月，同藥組CR為1例(7.6％)，PR為2例(15.4％)，SD為8例(61.5％)，RR為23％，PD為2例(15.4％)，DCR為86.4％，mPFS為5個月，換藥組CR為0例，PR為6例(42.8％)，SD為6例(42.8％)，進展為2例(14.3％)，RR為42.8％, mPFS為9.5個月，DCR為85.7％，兩組DCR用精確概率法計算P＞0.

9、05，無顯著性差異，兩組的PFS P＜0.05，有顯著性差異(Logrank檢驗);再使用的PFS換藥組明顯長于同藥組。
　　3.吉非替尼或厄洛替尼治療晚期非小細胞肺癌患者獲得性耐藥后，26例使用阿法替尼治療，4例確認為PR，總的反應(yīng)率(ORR)為15.3％(95％ CI，4％ to35％)，18例(69.23％)穩(wěn)定，9例(50％)疾病穩(wěn)定超過7個月，疾病控制率為84.6％(22/26)，中位無進展生存期(mPFS)為5.85個

10、月(95％ CI，3 to13.7月)，中位總生存期(mOS)為17.9 months(95％CI8.6，NA)，治療耐受性良好。
　　4.常規(guī)劑量的埃克替尼治療晚期非小細胞肺癌獲得性耐藥的25例患者，加倍劑量16例，逐片加量8例，脈沖式加量1例，2例無法評價療效，23例可評價病例均有效，8例(34.5％)(PR(2例為逐片加量)，13例(56.5％) SD，癥狀緩解，腫瘤標志物下降或穩(wěn)定，疾病控制率DCR91.3％，2例(8.7

11、％)PD，7例患者后因經(jīng)濟困難恢復(fù)常規(guī)劑量而病情進展，中位PFS4.5個月，不良反應(yīng)沒有增加。
　　結(jié)論：
　　1.水飛薊賓對肺癌細胞A549/H1650有一定的抑制作用，而且對吉非替尼有增敏作用，抑制肺癌細胞的上皮間質(zhì)化，這為水飛薊賓聯(lián)合吉非替尼治療晚期非小細胞肺癌、逆轉(zhuǎn)EGFR-TKI獲得性耐藥提供了理論依據(jù)。
　　2.EGFR-TKIs治療晚期NSCLC長期獲益后獲得性耐藥的患者，先化療、后再次應(yīng)用EGFR-TK