過敏性鼻炎患者外周血CD4+CXCR5+T細胞表面SLAM的變化及其調控作用的研究.pdf

1、目的:通過檢測過敏性鼻炎(allergic rhinitis，AR)患者外周血中CD4+CXCR5+T細胞比例及其表面分子SLAM(signaling lymphocyticactivation molecule)和下游銜接蛋白SAP(SLAM-associated protein)表達的變化，研究SLAM分子對CD4+CXCR5+T細胞的影響，初步探討SLAM在過敏性鼻炎致病過程中可能發(fā)揮的作用。
　　方法:
　　1.分離

2、人外周血單個核細胞，采用流式細胞術檢測AR患者和健康對照者外周血中CD4+CXCR5+T細胞占CD4+T細胞的比例。
　　2.流式細胞術檢測AR患者和健康對照者CD4+CXCR5+T細胞表面SLAM和其下游銜接蛋白SAP的表達。同時檢測CD19+B細胞表面SLAM的表達。
　　3.ELISA法檢測AR患者和健康對照者血漿中IgE水平，分別分析AR患者CD4+CXCR5+T中SLAM和SAP表達量與血漿IgE的相關性。

3、　　4.免疫磁珠法分選人外周血中CD4+CXCR5+T細胞，分別用抗SLAM抗體和同型IgG蛋白處理，48小時后ELISA法檢測培養(yǎng)上清中IL-21的水平。
　　5.ELISA法檢測AR患者和健康對照者血漿中IL-21的水平。分別分析血漿IL-21水平與CD4+CXCR5+T中SLAM、SAP表達量的相關性，以及血漿IL-21與IgE表達的相關性。
　　結果:
　　1.與健康對照者相比，AR患者外周血中，CD4+CXC

4、R5+T細胞占CD4+T細胞的比例沒有明顯差異（16.50±1.1190％ vs15.4±0.8521％）。
　　2.與健康對照者相比，AR患者CD4+CXCR5+T細胞表面SLAM以及其下游銜接蛋白SAP的表達水平都明顯降低（SLAM的平均熒光強度:61.81±2.937 vs51.25±2.162，P＜0.01;SAP的平均熒光強度:53.18±1.990 vs46.33±2.391，P＜0.05），且二者呈正相關(r=0.4

5、684，P=0.0242)。
　　3.與健康對照相比，AR患者CD19+B細胞占淋巴細胞百分比升高（7.928±0.5848％vs10.66±0.7986％，P＜0.05），但CD19+B細胞表面SLAM的表達明顯降低（SLAM的平均熒光強度:53.17±4.863 vs39.23±2.361，P＜0.05），CD4+CXCR5+T細胞表面SLAM與CD19+B細胞表面SLAM的表達之間無明顯相關性(r=0.0441，P=0.84

6、93)。
　　4.與健康對照相比，AR患者血漿IgE水平明顯上升（144.5±6.032 vs311.1±67.39μg/mL，P＜0.05），患者血漿IgE水平與CD4+CXCR5+T細胞中SLAM和SAP的表達量分別呈負相關(r=-0.4448，P=0.0335; r=-0.4369, P=0.0371)。
　　5.與健康對照組相比，AR患者血漿IL-21的水平顯著上升（63.93±3.809 vs86.42±5.227

7、 pg/mL，P＜0.01）。且血漿IL-21與CD4+CXCR5+T細胞上SLAM和SAP的表達量均呈負相關(r=-0.3245,P=0.0360; r=-0.3805,P=0.0129)。血漿IL-21與IgE的表達呈明顯正相關(r=0.3374，P=0.0289)。
　　6.與同型IgG相比，用抗SLAM抗體刺激人外周血中CD4+CXCR5+T細胞后，培養(yǎng)上清中IL-21水平明顯降低(130.4±17.23 vs67.47±

8、9.91 pg/mL, P＜0.05)。
　　結論:
　　1.過敏性鼻炎患者外周血CD4+CXCR5+T細胞中SLAM及SAP的表達均顯著降低，且兩者呈正相關;同時B細胞表面SLAM的表達也明顯降低。且CD4+CXCR5+T細胞SLAM及SAP的表達與血漿IgE水平呈負相關，能從一定程度上提示疾病狀態(tài)。
　　2.過敏性鼻炎患者血漿IL-21水平明顯高于健康對照者，并且IL-21水平與CD4+CXCR5+T細胞上SLAM