Nucleostemin在肝癌組織及離體細(xì)胞中的表達(dá)特性研究.pdf

1、Nucleostemin(核干細(xì)胞因子,NS)是一新近發(fā)現(xiàn)的細(xì)胞因子，由McKay and Tsai于2002年，在大鼠胚胎腦皮層干細(xì)胞和原始骨髓細(xì)胞中發(fā)現(xiàn)并克隆。NS蛋 白是一種p53結(jié)合蛋白，存在于干細(xì)胞核仁中。研究表明在胃癌、胰腺癌、膀胱癌、成骨肉瘤等癌組織，一些良性腫瘤和良性增生組織中NS基因也普遍高表達(dá)。NS在兩類細(xì)胞中的發(fā)現(xiàn)，暗示該基因在兩類細(xì)胞共同特征中可能起著相似的作用。 肝癌是國際上死亡率位于第五的惡性腫瘤

2、，并且國際上有關(guān)于NS基因在肝癌中表達(dá)情況如何還鮮有報(bào)道，因此肝癌這一典型的癌癥組織為NS的研究提供了很好的載體。本文研究NS基因在肝癌組織和細(xì)胞中的表達(dá)特性，探討NS基因在肝癌發(fā)生中的生理意義。 本研究先從肝癌組織cDNA庫中克隆出NS片段和全長；通過半定量-PCR的方法測(cè)定7種人胚胎組織中NS基因在轉(zhuǎn)錄水平上的表達(dá)情況；再以同樣方法在40對(duì)肝癌和癌旁組織及三種離體肝癌組織細(xì)胞株HepG2(人低轉(zhuǎn)移肝癌細(xì)胞系)、SMMC-77

3、2l(人肝癌細(xì)胞系，轉(zhuǎn)移能力較HepG2高)、MHCC(人高轉(zhuǎn)移肝癌細(xì)胞系)中測(cè)定NS基因轉(zhuǎn)錄水平的表達(dá)。證實(shí)在轉(zhuǎn)錄水平，NS基因的表達(dá)隨肝癌細(xì)胞增值能力及遷移能力的增強(qiáng)而升高。在翻譯水平上，先從上述三種離體細(xì)胞株中提取細(xì)胞蛋白，用Western-Blot的方法證實(shí)在翻譯水平，細(xì)胞核中的NS蛋白 隨細(xì)胞遷移能力的增強(qiáng)而增高。綜合以上各個(gè)結(jié)果，可以看出，NS基因確實(shí)在肝癌細(xì)胞增殖過程中發(fā)揮作用。 另外，本文還將NS的全長編碼序列