Fn14分子與肝癌的臨床病理因素、預后之間的關系研究.pdf

1、一、研究背景與目的：
　　 肝細胞肝癌(簡稱肝癌，Hepatocellular Carcinoma，HCC)是世界范圍內最為高發(fā)的惡性腫瘤之一[1]，在我國所有的惡性腫瘤死亡率中排第二位[2]，在某些農村地區(qū)居第一位。目前全球每年新發(fā)約50-60萬例肝癌，其中約42.5％發(fā)生在我國。由于肝癌術后的高復發(fā)率，目前針對肝癌的一般治療包括：手術切除、肝移植等的療效都不甚理想[3]。目前一些蛋白分子和信號轉導通路被證實與肝癌病人的預后相

2、關。然而肝癌的轉移與復發(fā)的機制并為完全弄清，尋找能夠預測肝癌病人預后的分子標志物還是有必要的。
　　 成纖維細胞生長因子誘導分子14(Fn14)是一個分子量為14-kDA大小的Ⅰ型跨膜蛋白受體，其基因定位于16號染色體短臂13區(qū)[4-5]。Fn14蛋白屬于腫瘤壞死因子受體超家族，并且在所有腫瘤壞死因子受體中其胞漿區(qū)最短：只有28個氨基酸。Fn14和腫瘤壞死因子樣凋亡弱誘導因子(TWEAK)是腫瘤壞死因子超家族的一對配體-受體。這

3、個信號轉導通路介導多種生物學功能，譬如：促炎癥、促血管生成、促進腫瘤侵襲轉移和生存等等[6]。Fn14分子缺乏死亡域，但是包含PIEET經典的腫瘤壞死因子受體相關因子結合序列(TRAF，tumor necrosis factor receptor associated factors)，該結合序列能夠通過結合TRAF-1，2，3和5來招募TRAP接頭蛋白，進而激活下游的信號轉導通路，諸如：NF-κB、MAPK和AKT信號轉導通路[7-9

4、]。越來越多的證據表明，F(xiàn)n14在多種腫瘤中是高表達的，例如：乳腺癌[10]、惡性神經膠質瘤[11]、食管腺癌[12]和胰腺癌[13]，并且Fn14的過表達與這些腫瘤較差的預后相關。有研究表明，在體外實驗中遷移至外圍的神經膠質瘤細胞其Fn14的表達要比在中心生長的腫瘤細胞高，而且來源于神經膠質瘤病人瘤體外周的腫瘤細胞也發(fā)現(xiàn)其Fn14表達要比瘤體中心的細胞高。進一步的實驗表明，F(xiàn)n14基因促進神經膠質瘤細胞的遷移與Racl和NF-κB的信

5、號轉導通路的激活有關[11，14]。Wang等人發(fā)現(xiàn)，F(xiàn)n14基因在食管腺癌中是與其病程特異性相關的12個基因之一，并且Fn14基因量表達最高[15]。Willis等人報道，F(xiàn)n14的表達與乳腺癌的轉移、淋巴結分期、HER2-陽性/ER-陰性成正相關[10]。體外研究表明，F(xiàn)n14/TWEAK信號轉導通路能夠通過誘導Bc1-2家族成員的表達保護神經膠質瘤細胞避免發(fā)生因細胞毒性試劑引起的凋亡[16]。該信號轉導通路也可以通過上調MMP-9

6、的表達來促進乳腺癌的轉移[17]。
　　 早在2000年就有報道表明，F(xiàn)n14基因主要在低分化的肝細胞癌細胞系中過表達[24]，進一步體外的研究表明，F(xiàn)n14/TWEAK信號轉導通路能夠促進多種肝細胞癌細胞系的增殖[18]。最新的體內研究表明，在CDE(choline-deficient，ethionine-supplemented)飲食誘導的肝損傷老鼠模型中，F(xiàn)n14/TWEAK信號轉導通路能夠促進肝的祖細胞(LPC，live

7、r progenitor cell)有絲分裂[19]。以上研究結果提示，F(xiàn)n14基因可能能夠促進肝癌的轉移與侵襲，然而Fn14基因在肝細胞癌中的表達水平與其臨床預后還沒有被報道。本研究意在探討肝癌病人行手術切除治療后Fn14基因對其預后的影響。
　　 二.研究對象與方法：
　　 用實時定量PCR(RT-PCR)和蛋白免疫印跡法(Western-Blot)檢測Fn14基因和蛋白在成對肝癌-癌旁樣本中的表達情況，進一步證實F

8、n14基因在肝癌和癌旁中的表達差異。我們進一步用由260例伴有不同類型門脈癌栓的肝癌樣本組成的組織芯片進行Fn14蛋白的免疫組化染色來探究Fn14蛋白的表達情況與肝癌的其他臨床病理特征、腫瘤的復發(fā)和病人的生存期之間的關系。
　　 三、研究結果：
　　 與癌旁肝組織相比，F(xiàn)n14基因在肝癌組織中明顯高表達。Fn14蛋白尤其在伴有AFP水平升高(AFP≥20ng/mL)、腫瘤數目較多(腫瘤數目≥2)的肝癌中高表達。通過對組織