添加劑與流加操作輔助變性溶菌酶復(fù)性動(dòng)力學(xué).pdf

1、該文研究了添加劑與流加操作輔助變性溶菌酶復(fù)性動(dòng)力學(xué).首先針對(duì)氧化型谷胱苷肽與還原型谷胱苷肽的比例對(duì)于人工伴侶輔助溶菌酶復(fù)性的影響進(jìn)行了研究,優(yōu)化了人工伴侶輔助復(fù)性的反應(yīng)條件;然后詳細(xì)研究了酰胺類添加劑對(duì)促進(jìn)溶菌酶的復(fù)性作用,并根據(jù)三階復(fù)性動(dòng)力學(xué)模型,分析了復(fù)性動(dòng)力學(xué)行為;在此基礎(chǔ)上,開發(fā)出流加操作耦合人工伴侶輔助溶菌酶復(fù)性的新方法,并且考察了各種因素對(duì)復(fù)性效果的影響;最后,通過對(duì)流加結(jié)束后間歇階段計(jì)算方法的修正,完善了流加條件下溶菌酶復(fù)

2、性的過程動(dòng)力學(xué)模型,并通過實(shí)驗(yàn)做了進(jìn)一步驗(yàn)證.實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明,在適量的還原型谷胱苷肽存在下,改變氧化型谷胱苷肽濃度對(duì)反應(yīng)速率常數(shù)K<,N>及K<,A>都有影響.當(dāng)兩者濃度比適宜時(shí),會(huì)使K<,N>/K<,A>出現(xiàn)最大值,即可獲得最好的復(fù)性收率.固定氧化型谷胱苷肽,改變還原型谷胱苷肽濃度對(duì)伴侶輔助溶菌酶復(fù)性速率常數(shù)K<,N>和K<,A>影響都較小.六種酰胺類添加劑輔助溶菌酶復(fù)性,均存在最佳濃度使復(fù)性收率最大.其輔助溶菌酶復(fù)性機(jī)理與鹽酸胍類似,

3、K<,N>值均隨添加劑濃度的增大而減小,K<,A>值則在最佳添加劑濃度下出現(xiàn)最小值,此時(shí),K<,N>/K<,A>值最大,復(fù)性收率r值最大.流加作用耦合人工伴侶可使較高濃度的變性溶菌酶(2mg/ml)在較低的鹽酸胍濃度下(1mol/L)達(dá)到完全復(fù)性.人工伴侶系統(tǒng)中CTAB是影響復(fù)性效果的重要因素,當(dāng)β-CD濃度一定時(shí),CTAB濃度存在最佳值,使復(fù)性收率最高.另外,鹽酸胍與人工伴侶存在協(xié)同作用,當(dāng)人工伴侶濃度和鹽酸胍濃度適當(dāng)時(shí),能夠獲得較高