重度子癇前期與假性血友病因子相關(guān)性的臨床標(biāo)本檢測(cè)和體外實(shí)驗(yàn)研究.pdf

1、【目的】
　　通過體外實(shí)驗(yàn)和臨床標(biāo)本檢測(cè),研究重度子癇前期假性血友病因子(Von Willebrand Factor,VWF)轉(zhuǎn)錄、合成、分泌水平變化特點(diǎn)。
　　【方法】
　　1.無菌采集并枸櫞酸鈉抗凝孕產(chǎn)婦分娩前、分娩后第3天外周血和臍血;剖宮產(chǎn)術(shù)中無菌采集臍帶和胎盤組織;
　　2.臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞(HUVEC,human umbilical vein endothelial cell)原代及傳代培養(yǎng);
　

2、　3.熒光定量PCR法檢測(cè)臍帶和胎盤組織中內(nèi)皮細(xì)胞表達(dá)VWF水平以及Cocl2(100umol/L)對(duì)傳代培養(yǎng)的臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞VWF表達(dá)的影響;
　　4.免疫組織化學(xué)方法檢測(cè)臍帶和胎盤組織中內(nèi)皮細(xì)胞VWF的合成以及Cocl2(100umol/L)對(duì)傳代培養(yǎng)的臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞VWF表達(dá)的影響;
　　5.ELISA檢測(cè)孕產(chǎn)婦分娩前、分娩后第3天外周血和臍血血漿中VWF蛋白量以及Cocl2(100umol/L)對(duì)傳代培養(yǎng)的臍靜脈內(nèi)皮

3、細(xì)胞分泌VWF的影響。
　　【結(jié)果】
　　1.與正常妊娠組比較,重度子癇前期組分娩前、分娩后第3天外周血和臍血血漿中VWF水平均明顯升高;與分娩前相比,兩組產(chǎn)后第3天血漿中VWF水平均無明顯改變(P>0.05);
　　2.與正常妊娠組比較,重度子癇前期組胎盤和臍帶組織中內(nèi)皮細(xì)胞VWF編碼基因轉(zhuǎn)錄水平均明顯升高(P<0.05);
　　3.與正常妊娠組比較,重度子癇前期組胎盤和臍帶組織內(nèi)皮細(xì)胞內(nèi)VWF蛋白水平無明顯差

4、異(P>0.05);
　　4.Cocl2(100umol/L)誘導(dǎo)細(xì)胞缺氧可以導(dǎo)致內(nèi)皮細(xì)胞合成和分泌VWF增加,而細(xì)胞內(nèi)VWF水平無明顯改變。
　　【結(jié)論】
　　1.重度子癇前期孕產(chǎn)婦外周血中VWF蛋白含量增加且分娩后第3天仍無明顯下降;胎盤和臍帶VWF表達(dá)和分泌增加;
　　2.Cocl2誘導(dǎo)內(nèi)皮細(xì)胞缺氧可以導(dǎo)致內(nèi)皮細(xì)胞表達(dá)和分泌VWF增加;
　　3.內(nèi)皮細(xì)胞缺氧可能是子癇前期出現(xiàn)VWF表達(dá)和分泌增加的原因