藥物誘導(dǎo)腎損傷和糖尿病腎病對(duì)比劑急性腎損傷大鼠模型的比較.pdf

1、目的：分別建立藥物誘導(dǎo)腎損傷基礎(chǔ)上對(duì)比劑急性腎損傷大鼠模型和糖尿病腎病基礎(chǔ)上對(duì)比劑急性腎損傷大鼠模型，探討對(duì)比劑腎病模型的建立方法和對(duì)比劑腎病的發(fā)病機(jī)制，并且比較兩種動(dòng)物模型的異同。
　　方法：取健康雄性SD大鼠80只，分別取40只建立藥物誘導(dǎo)腎損傷基礎(chǔ)上對(duì)比劑急性腎損傷大鼠模型和糖尿病腎病基礎(chǔ)上對(duì)比劑急性腎損傷大鼠模型。藥物誘導(dǎo)腎損傷基礎(chǔ)上對(duì)比劑急性腎損傷大鼠模型的建立：40只大鼠，隨機(jī)分為對(duì)照組(N1)、對(duì)比劑組(CM1)、腎

2、損傷組(S)、對(duì)比劑腎病組(M)，每組10只。脫水24小時(shí)后，經(jīng)股靜脈間隔15分鐘依次注射吲哚美辛(INDO，10mg/kg)、L-NG-硝基精氨酸甲酯(L-NAME，10mg/kg)和76％的復(fù)方泛影葡胺(DTZ，10ml/kg)建立對(duì)比劑腎病模型，繼續(xù)脫水24小時(shí)候后處死大鼠。糖尿病腎病基礎(chǔ)上對(duì)比劑急性腎損傷大鼠模型的建立：40只大鼠，隨機(jī)分為對(duì)照組(N2)、對(duì)比劑組(CM2)、糖尿病組(DM)、對(duì)比劑腎病組(DCM)，每組10只。

3、適應(yīng)性飼養(yǎng)1周后，禁食24小時(shí)，大鼠腹腔注射2％的STZ(60mg/kg，3ml/kg)建立糖尿病模型。繼續(xù)飼養(yǎng)8周，第10周末，留取24小時(shí)尿液后，連續(xù)兩天，分別經(jīng)雙側(cè)股靜脈每天注入76％的復(fù)方泛影葡胺(DTZ，10ml/kg)建立對(duì)比劑腎病模型，脫水24小時(shí)后處死大鼠。檢測(cè)血肌酐(Scr)、尿素(Urea)、尿酸(UA)、尿肌酐，計(jì)算內(nèi)生肌酐清除率(Ccr)和單位體重肌酐清除率(Kcr)。腎皮、髓質(zhì)組織勻漿檢測(cè)髓過(guò)氧化物酶(MPO)

4、、谷胱甘肽過(guò)氧化物酶(GSH-Px)、總超氧化物歧化酶(T-SOD)活性，丙二醛(MDA)含量。觀察腎臟組織病理學(xué)改變，免疫組化檢測(cè)caspase-3和caspase-9表達(dá)。
　　結(jié)果：(1)藥物誘導(dǎo)腎損傷基礎(chǔ)上對(duì)比劑腎病大鼠模型：在造模過(guò)程中，S組死亡1只，M組死亡2只，其余各組無(wú)死亡。研究結(jié)果顯示，造模前，各組大鼠的Scr、Ccr、單位體重肌酐清除率(Kcr)等指標(biāo)無(wú)顯著差異。脫水1天后，各組間Scr無(wú)顯著性差異；而S組和M

5、組Ccr、Kcr較N1組和CM1組已略有下降。這說(shuō)明，在脫水1天后，大鼠的腎功能已受到影響。在處死時(shí)，N1組和CM1組的血Urea、UA無(wú)明顯差異；S組和M組血Urea、UA較N1和CM1組顯著增高；M組較S組，血Urea顯著增高，而血UA無(wú)顯著性差異。尿微量白蛋白在處死時(shí)，N1組和CM1組無(wú)顯著性差異；M組和S組較N1組和CM1組明顯增高，M組較S組顯著增高。且造模前后相比，M組各項(xiàng)指標(biāo)差異也最顯著。病理結(jié)果顯示，M組可見到明顯的腎小

6、管官腔擴(kuò)張，官腔中可見蛋白管型，上皮細(xì)胞扁平，并可見到明顯的空泡變性，部分腎小管細(xì)胞壞死、脫落，以及小管間質(zhì)炎癥反應(yīng)；S組和CM1組僅見到類似M組改變，但病變輕微。腎組織勻漿結(jié)果顯示，腎皮、髓質(zhì)T-SOD和GSH-Px活性在M組較S組顯著降低，而N1組和CM1則無(wú)顯著性差異；MPO活性和MDA含量在M組較S組顯著增高，而在N1組和CM1組則無(wú)顯著性差異。免疫組化結(jié)果顯示，N1組和CM1組caspase-3、caspase-9的表達(dá)無(wú)顯著

7、性差異，M組較S組caspase-3、caspase-9表達(dá)明顯增高。(2)糖尿病腎病基礎(chǔ)上對(duì)比劑急性腎損傷大鼠模型：在整個(gè)實(shí)驗(yàn)過(guò)程中大鼠無(wú)死亡。研究結(jié)果顯示，造模前，DM組和DCM組較N2組和CM2組Scr降低、Ccr升高，但各組間無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義；但DM組和DCM組較N2組和CM2組Kcr顯著增高，而DM組和DCM組和N2組和CM2組之間比較則無(wú)顯著性差異；DM組和DCM組較N2組和CM2組血Urea增高、血UA下降，但結(jié)果無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義

8、。CIN造模后，CM2組較N2組Scr增高、血Urea增高、Ccr降低、Kcr降低，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，而血UA則無(wú)顯著差異；DCM組較DM組Scr、血Urea、血UA顯著增高，Ccr、Kcr顯著降低。造模前后相比，DCM組各項(xiàng)指標(biāo)差異最為顯著。腎組織勻漿結(jié)果顯示，腎皮、髓質(zhì)T-SOD和GSH-Px活性在DCM組較DM顯著降低，在CM2組較N2組顯著降低：MPO活性和MDA含量在DCM組較DM組顯著增高，在CM2組較N2組顯著性增高。病

9、理結(jié)果顯示：在DM組可見腎小管上皮細(xì)胞顆粒樣變性，有少量脂肪滴，腎小管輕度擴(kuò)張，管腔中可見少量蛋白管型，上皮細(xì)胞扁平；在DCM組可見到明顯的腎小管管腔擴(kuò)張，管腔中可見蛋白管型，上皮細(xì)胞扁平，并可見到明顯的空泡變性，部分腎小管細(xì)胞壞死、脫落，以及小管間質(zhì)炎癥反應(yīng)。在CM組，病理改變輕微。免疫組化結(jié)果顯示，CM2組較N2組及DCM組較DM組caspase-3、caspase-9的表達(dá)顯著增高。
　　結(jié)論：(1)兩種方法均能成功建立對(duì)比