慶大霉素誘導(dǎo)的急性腎損傷大鼠腎髓質(zhì)UT-A表達(dá)研究.pdf

1、目的：研究慶大霉素誘導(dǎo)的大鼠急性腎損傷后不同時間腎髓質(zhì)組織尿素轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白的表達(dá)改變；不同劑量的慶大霉素誘導(dǎo)大鼠急性腎損傷后腎髓質(zhì)組織尿素轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白的表達(dá)變化。 方法：65只50天齡，體重170-180g的雄性Wistar大鼠隨機(jī)分為四組：(1)對照組(Cont組，n=15)，用等量生理鹽水代替慶大霉素腹腔注射；(2)慶大霉素組Ⅰ(Gent組Ⅰ，n=20)，腹腔注射慶大霉素(上海中西制藥有限公司，批號050605，國藥準(zhǔn)字H31022

2、243), 140mg/KgBW/day，每日一次，共7天，制備成急性腎損傷模型；在實驗的第1天，第3天，第7天和第14天從Gent組Ⅰ及Cont組分別取5只大鼠留取24小時尿后，處死大鼠并觀察:①腎功能指標(biāo),24小時尿量(UV) 、血清肌酐(SCr) 、血尿素氮(BUN) 、尿滲透壓; ②腎組織形態(tài)學(xué)改變,光鏡觀察腎皮質(zhì)和髓質(zhì)結(jié)構(gòu)的改變;③用RT-PCR方法觀察腎髓質(zhì)組織勻漿UT-A1mRNA表達(dá)量的變化。（3）慶大霉素組Ⅱ(Gent

3、組Ⅱ，n=5),腹腔注射慶大霉素140mg/KgBW/day或200mg/KgBW/day或400mg/KgBW/day，每日一次，共3天，制備成急性腎損傷模型，在實驗的第3天處死大鼠，用RT-PCR方法觀察腎髓質(zhì)組織勻漿UT-A1 mRNA表達(dá)量的變化。(4) 慶大霉素組Ⅲ(Gent組Ⅲ，n=25),腹腔注射慶大霉素，400mg/KgBW/day，每日一次，共3天，制備成急性腎損傷模型。在實驗的第2小時，第6小時，第24小時，第48小

4、時，第72小時處死大鼠，用RT-PCR方法觀察腎髓質(zhì)組織勻漿UT-A1 mRNA表達(dá)量的變化。 結(jié)果：（1） Gent組Ⅰ于實驗的第3天和第7天UV、 SCr、BUN水平顯著高于Cont組，p<0.05；尿滲透壓低于Cont組，p<0.05；第一天和第14天與Cont組比較無明顯差別，p>0.05;光鏡下各組腎小球及腎血管未觀察到明顯病變，各組遠(yuǎn)端小管和集合管上皮細(xì)胞病理改變亦不明顯，注射Gent后第3天，Gent組Ⅰ可見腎皮

5、質(zhì)內(nèi)開始出現(xiàn)炎細(xì)胞的灶性浸潤，部分近曲小管出現(xiàn)上皮細(xì)胞空泡變性及壞死、脫落，5只大鼠組織學(xué)分級為1級2只、2級2只，3級1只;注射Gent后第7天，Gent組Ⅰ腎皮質(zhì)內(nèi)幾乎全部近曲小管上皮細(xì)胞出現(xiàn)廣泛性壞死，壞死的上皮細(xì)胞脫落入管腔，致使管腔內(nèi)充滿紅色顆粒狀壞死物，阻塞管腔，部分腎小管內(nèi)可見蛋白管型，3只大鼠組織學(xué)分級為4級，2只為3級；Gent組Ⅰ第14天近曲小管結(jié)構(gòu)開始恢復(fù)，出現(xiàn)新生的近曲腎小管上皮細(xì)胞，5只大鼠組織學(xué)分級為1級3只

6、，0級2只，Gent組Ⅰ第1天和 Cont組未見明顯的病理改變，全部大鼠組織學(xué)分級皆為0級；Gent組Ⅰ隨時間延長，UT-A1 mRNA表達(dá)量與對照組比較逐漸降低,第3天和第7天UT-A1 mRNA表達(dá)量與對照組比較P值分別為0.019和0.012，有統(tǒng)計學(xué)意義，第1天和第14天UT-A1 mRNA表達(dá)量與對照組比較P值分別為0.961和0.859，無統(tǒng)計學(xué)意義。（2）140mg/KgBW/day、200mg/KgBW/day和400m

7、g/KgBW/day慶大霉素誘導(dǎo)大鼠急性腎損傷后第3天，腎髓質(zhì)組織UT-A1 mRNA表達(dá)明顯降低，呈劑量依賴性，140mg/KgBW/day和200mg/KgBW/day 比較，差別無統(tǒng)計學(xué)意義；400mg/KgBW/day 與140mg/KgBW/day和200mg/KgBW/day 比較，差別有統(tǒng)計學(xué)意義。（3）Gent組Ⅲ與對照組比較，第2小時P值為0.022，P〈0.05，差別有統(tǒng)計學(xué)意義；第6小時、第24小時和第48小時的表

8、達(dá)量與對照組相比，P值分別為0.008、0.002、0.001，P〈0.01，差別均有顯著統(tǒng)計學(xué)意義，并且第72小時逆轉(zhuǎn)錄產(chǎn)物低于可發(fā)現(xiàn)的低限值，無法測量出曲線下峰面積。 結(jié)論：（1）慶大霉素可導(dǎo)致大鼠腎髓質(zhì)近曲小管上皮細(xì)胞變性、壞死，導(dǎo)致大鼠腎功能損害。（2）慶大霉素可導(dǎo)致大鼠腎髓質(zhì)組織UT-A1表達(dá)降低，這可能是慶大霉素誘導(dǎo)急性腎損傷后尿濃縮功能降低的原因之一。（3）慶大霉素抑制導(dǎo)致大鼠腎髓質(zhì)組織UT-A1表達(dá)呈時間和劑量