應(yīng)用孕鼠腹腔注射脂多糖合并缺氧方法制作腦癱動(dòng)物模型的實(shí)驗(yàn)研究.pdf

1、小兒腦性癱瘓(cerebral palsy,CP)簡(jiǎn)稱腦癱,是指從出生前到出生后一個(gè)月內(nèi)，因各種原因所致腦發(fā)育早期產(chǎn)生的非進(jìn)行性腦損傷,主要表現(xiàn)為中樞性運(yùn)動(dòng)障礙及姿勢(shì)異常,同時(shí)經(jīng)常伴有其他如智力低下、癲癇、語(yǔ)言障礙、行為異常及感知覺等并發(fā)障礙，遠(yuǎn)期觀察會(huì)出現(xiàn)不同程度的神經(jīng)發(fā)育障礙。小于胎齡兒、低出生體重兒、窒息復(fù)蘇、低氧血癥及輔助通氣等均為早產(chǎn)兒腦損傷的高危因素。其中早產(chǎn)、低出生體重兒是目前公認(rèn)的最主要的腦癱致病因素之一，且孕齡越小,出

2、生體重越低,腦癱患病率就越高。在這些出生早產(chǎn)兒中，其中5%～10%患兒表現(xiàn)出運(yùn)動(dòng)能力的不協(xié)調(diào)性,通常是痙攣性一側(cè)肢體的偏癱,除此之外,25%～50%高危兒將會(huì)出現(xiàn)細(xì)微的精細(xì)運(yùn)動(dòng)和認(rèn)知記憶障礙，CP的發(fā)生以嚴(yán)重影響了我國(guó)小兒成長(zhǎng)中的日常生活和學(xué)習(xí)，以及生活質(zhì)量和人口素質(zhì)的提供。
　　 目前無(wú)論是對(duì)腦癱的流行病學(xué)的研究,還是對(duì)腦癱發(fā)病機(jī)制的認(rèn)識(shí)，都在發(fā)生著很大的變化，各種觀點(diǎn)不一致，雖然公眾普遍認(rèn)為，小兒腦癱的發(fā)生主要是與產(chǎn)前、產(chǎn)中

3、、產(chǎn)后小兒腦損傷有關(guān),但是,最新研究越來(lái)越多的證實(shí)，腦癱病因具有多樣性和復(fù)雜性，其發(fā)病機(jī)制復(fù)雜，是一種多因素作用下的結(jié)果。引起早產(chǎn)兒腦損傷主要與早產(chǎn)兒圍產(chǎn)期窒息、缺氧缺血、宮內(nèi)感染以及免疫學(xué)機(jī)制等有關(guān)。缺氧缺血和感染是導(dǎo)致早產(chǎn)兒腦損傷(white matter damage，WMD)主要病因，尤其是以腦室周圍白質(zhì)軟化(periventricular leukomalacia，PVL)為主要特征是導(dǎo)致早產(chǎn)兒發(fā)生腦癱、認(rèn)知以及視聽障礙等嚴(yán)重

4、后遺癥的病理表現(xiàn)之一，PVL在早產(chǎn)兒中的發(fā)生率非常高,國(guó)外研究資料表明，PVL在早產(chǎn)兒的發(fā)生率為8%-26%，有PVL跡象的早產(chǎn)兒高達(dá)75％；在出生體重小于1500g早產(chǎn)兒中，PVL發(fā)生率為5%-17%,且66%-99%早產(chǎn)兒發(fā)生了腦癱,25%的早產(chǎn)兒中存在神經(jīng)運(yùn)動(dòng)功能障礙,25%-50%的學(xué)齡期患兒表現(xiàn)學(xué)習(xí)和認(rèn)知功能障礙[9-11]，其逐年在增高, PVL損傷部位主要以側(cè)腦室外角部、前角和體部的白質(zhì)以及視聽放射區(qū)為主。對(duì)PVL的發(fā)病過(guò)

5、程目前尚不完全清楚,可能與早產(chǎn)兒腦血管發(fā)育缺陷、少突膠質(zhì)細(xì)胞(OL)前體對(duì)缺血缺氧的易損性，以及缺乏內(nèi)源性保護(hù)因子等因素有關(guān)[12-13]，其病理改變表現(xiàn)為[14-15]腦室周圍正常白質(zhì)結(jié)構(gòu)的破壞、炎癥細(xì)胞的侵潤(rùn)、膠質(zhì)細(xì)胞凋亡增加、脫髓鞘改變以及軸突破壞等有關(guān)，業(yè)已證明PVL是導(dǎo)致早產(chǎn)兒死亡和傷殘的重要的病理因素，多發(fā)生于胎齡23～32周的早產(chǎn)兒，是導(dǎo)致存活早產(chǎn)兒出現(xiàn)遠(yuǎn)期神經(jīng)發(fā)育、智力運(yùn)動(dòng)異常、行為障礙等后遺癥發(fā)生的重要病理原因，目前對(duì)

6、小兒腦癱尚無(wú)特殊、全面系統(tǒng)的治療方法，因此，對(duì)CP患兒進(jìn)行早期的診斷、早期干預(yù)、提高CP患兒的生存和生活品質(zhì)；是目前對(duì)腦癱患兒亟待解決的重大課題。所以，動(dòng)物模型的建立就被廣泛應(yīng)用到基礎(chǔ)研究中，因?yàn)榻?dòng)物模型是進(jìn)行基礎(chǔ)實(shí)驗(yàn)研究的前提條件,借助可行的、逼真的動(dòng)物模型,就可以更深入細(xì)致得研究早產(chǎn)兒腦損傷的病因、病理、發(fā)病機(jī)制以及治療和預(yù)后。因此，建立一個(gè)簡(jiǎn)單易行、切實(shí)可行的腦癱動(dòng)物模型，對(duì)疾病的實(shí)驗(yàn)研究和臨床工作都具有重大的研究意義。

7、>　　 目前早產(chǎn)兒腦損傷的動(dòng)物模型眾多,主要的制模方法有早產(chǎn)、感染、缺血缺氧及膽紅素等病理因素導(dǎo)致的早產(chǎn)兒腦損傷，在眾多的動(dòng)物模型中，國(guó)內(nèi)、國(guó)外較為公認(rèn)、相對(duì)可靠穩(wěn)定的動(dòng)物模型是以單側(cè)頸動(dòng)脈結(jié)扎聯(lián)合缺氧造成一側(cè)大腦半球缺血缺氧動(dòng)物模型，但是，腦癱是一種發(fā)病緩慢，早期臨床癥狀不典型的疾病，該動(dòng)物模型主要是用來(lái)研究急性期或亞急性期的病變,與這種相對(duì)靜止期的病理變化不相符合,并且實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的組織改變并不能代表人類的病理變化，動(dòng)物在實(shí)驗(yàn)過(guò)程中表

8、現(xiàn)出的運(yùn)動(dòng)神經(jīng)系統(tǒng)等癥狀也不能反應(yīng)出腦癱患兒的臨床表現(xiàn)，想要將其成熟地運(yùn)用到腦癱動(dòng)物模型,還有待于進(jìn)一步制定統(tǒng)一的評(píng)判標(biāo)準(zhǔn)。
　　 本課題旨在通過(guò)應(yīng)用孕鼠腹腔注射脂糖聯(lián)合全身缺氧方法共同作用下誘發(fā)胎鼠早產(chǎn)導(dǎo)致動(dòng)物腦癱，并在此基礎(chǔ)上進(jìn)行神經(jīng)行為學(xué)、Morris水迷宮空間記憶實(shí)驗(yàn)、神經(jīng)電生理、病理形態(tài)學(xué)等檢測(cè)指標(biāo)來(lái)全面觀察新生小鼠的行為反應(yīng)，全面探討和總結(jié)模型的評(píng)價(jià)鑒定方法，真實(shí)客觀的反應(yīng)模型的可重復(fù)性、模型與人類疾病的相似性或可比