假膜成纖維細(xì)胞誘導(dǎo)裸鼠骨溶解動(dòng)物模型的實(shí)驗(yàn)研究.pdf

1、【目的】：研究應(yīng)用假膜成纖維細(xì)胞構(gòu)建人工關(guān)節(jié)周圍骨溶解裸鼠體內(nèi)模型的可行性。【方法】：本實(shí)驗(yàn)于2006年5月至2007年1月于上海市第六人民醫(yī)院中心實(shí)驗(yàn)室和動(dòng)物實(shí)驗(yàn)室完成,取裸鼠(SCID小鼠)15只,隨機(jī)分為三組,每組5只;分別為假膜成纖維細(xì)胞組(組I),關(guān)節(jié)囊成纖維細(xì)胞組(組II),對(duì)照組(組III),假膜成纖維細(xì)胞組從人工關(guān)節(jié)無(wú)菌性松動(dòng)翻修術(shù)中取得的假膜組織,分離出成纖維細(xì)胞,經(jīng)過(guò)3～4次傳代后,應(yīng)用骨水泥刺激成纖維細(xì)胞后植入裸鼠

2、的顱蓋骨上;關(guān)節(jié)囊成纖維細(xì)胞組從初次人工關(guān)節(jié)置換術(shù)中取出部分關(guān)節(jié)囊組織,分離出成纖維細(xì)胞經(jīng)過(guò)與組I同樣的處理后植入裸鼠的顱蓋骨上,對(duì)照組為假手術(shù)組;兩周后處死裸鼠,取出顱蓋骨脫鈣處理后切片,應(yīng)用影像軟件分析裸小鼠顱中縫的骨溶解情況,定量分析骨溶解的面積以判斷骨吸收的程度?！窘Y(jié)果】：假膜組織和關(guān)節(jié)囊組織中分離出的細(xì)胞經(jīng)過(guò)鑒定表達(dá)成纖維細(xì)胞相關(guān)抗原(脯氨酸-4-羥化酶),經(jīng)RT-PCR檢測(cè)發(fā)現(xiàn)假膜成纖維細(xì)胞高表達(dá)RANKL與OPG的mRNA

3、,假膜組織的成纖維細(xì)胞植入裸鼠顱蓋骨后可以從H-E染色的切片中觀察到裸鼠顱蓋骨骨吸收,經(jīng)過(guò)IPP軟件分析測(cè)量后假膜成纖維細(xì)胞組平均骨吸收面積為0.23±0.030 mm2(P＜0.05),明顯高于關(guān)節(jié)囊成纖維細(xì)胞組(組Ⅱ)(0.083±0.013mm2)和對(duì)照組(組Ⅲ)(0.078±0.009 mm2)?！窘Y(jié)論】：從假膜中分離成纖維細(xì)胞可操作性強(qiáng),假膜成纖維細(xì)胞植入裸鼠后可以成功誘導(dǎo)骨溶解形成,可重復(fù)性強(qiáng),可以作為研究人工關(guān)節(jié)周圍骨溶解