吡格列酮對3T3 L1前脂肪細胞功能的影響初步研究.pdf

1、目的：觀察吡格列酮培養(yǎng)的前脂肪細胞增殖和分化情況,檢測細胞上清液中apelin濃度的變化,探討噻嘩烷二酮類藥物對脂肪組織內(nèi)分泌功能的影響機制。
　　 方法：分別用含有四個不同濃度的吡咯列酮的基礎(chǔ)培養(yǎng)液進行前脂肪細胞的體外培養(yǎng),48小時后用ELISA法檢測細胞上清液apelin濃度,MTT法檢測細胞增殖情況,尋找有效的吡格列酮干預濃度。根據(jù)培養(yǎng)液不同而設(shè)立空白對照組A、分化對照組B、實驗組C三組,在干預后的第24、48、72小時分

2、別以ELISA法檢測培養(yǎng)上清液apelin濃度,并觀察細胞增殖、聚脂分化指標。后續(xù)于分化第5、10天取三組細胞,測定其油紅O染色吸光度值。評價各組處理對前脂肪細胞apelin分泌水平、細胞增殖分化指標的影響。
　　 結(jié)果:1、A、B及C組上清液中可檢測到apelin,并隨培養(yǎng)時間而變化,B組、C組培養(yǎng)72小時后apelin濃度較A組分別增加了33.7％、32.5％(P<0.05)。2、對細胞分化的影響:油紅O染色測定結(jié)果表明,吡

3、格列酮濃度分別為10μmol/l_.,100μmol/L時其吸光度值大于對照組。在第24、48小時,C組油紅O染色吸光度值與B組比較無明顯差異；第72小時,C組吸光度值高于A組,差異有統(tǒng)計學意義(P<0.05),但低于B組；而在第10天B、C兩組差異不明顯(P≥0.05),但與A組比較,其差異仍較明顯(P<0.05)。C組培養(yǎng)前脂肪細胞約3天,部分細胞胞漿內(nèi)可見脂滴,干預5d、10d時能促進前脂肪細胞的胞漿內(nèi)聚脂,結(jié)果較A組分別增加了3

4、6.8％、59.8％(P<0.05)。3、對細胞增殖的影響:MTT法檢測結(jié)果顯示,隨吡格列酮濃度增加,前脂肪細胞數(shù)有增加趨勢,100μmol/L吡格列酮明顯促進前脂肪細胞的增殖,在24、48、72小時細胞增殖較對照組分別增加了8.1％、20.2％和15.2％(P<0.05)。
　　 結(jié)論：前脂肪細胞可分泌脂肪因子apelin,其表達水平與細胞生長狀態(tài)有關(guān)。吡格列酮可促進前脂肪細胞增殖和分化,促增殖作用呈時間和劑量依賴性,其促分化