Livin及PTEN在視網(wǎng)膜母細胞瘤中的表達及拓撲替康對其增殖凋亡的影響.pdf

1、第一部分、Livin及PTEN蛋白在視網(wǎng)膜母細胞瘤中的表達及其與視網(wǎng)膜母細胞瘤臨床病理特征的關(guān)系
　　 目的:研究視網(wǎng)膜母細胞瘤(retinoblastoma，RB)組織中Livin和PTEN蛋白的表達，探討視網(wǎng)膜母細胞瘤中Livin和PTEN蛋白的表達及其與視網(wǎng)膜母細胞瘤臨床病理特征的關(guān)系。
　　 方法:選取2000年1月至2010年12月在我院行手術(shù)治療，并經(jīng)病理證實為視網(wǎng)膜母細胞瘤的43例患者的視網(wǎng)膜組織切片，用M

2、ax-visionTM快捷免疫組化法聯(lián)合檢測Livin和PTEN在正常視網(wǎng)膜和視網(wǎng)膜母細胞瘤中的表達及其兩者的相關(guān)性，并分析其與視網(wǎng)膜母細胞瘤臨床病理特征之間的關(guān)系。
　　 結(jié)果:
　　 1.視網(wǎng)膜母細胞瘤組中Livin、PTEN陽性表達分別為27例(62.79％)、20例(46.51％)，對照組分別為7例(20.59％)、31例(91.18％);Livin在視網(wǎng)膜母細胞瘤組織中的表達明顯高于正常視網(wǎng)膜組織(x2=3.7

3、14，p＜0.05)，PTEN蛋白在視網(wǎng)膜母細胞瘤中表達與正常對照組比較明顯降低（x2=16.937，p＜0.05）。
　　 2.Livin表達與視網(wǎng)膜母細胞瘤的分化程度有關(guān)，PTEN表達與視網(wǎng)膜母細胞瘤的分化程度及臨床分期有關(guān)(p均＜0.05)。
　　 3.視網(wǎng)膜母細胞瘤標本中，27例Livin陽性表達的標本中，PTEN陽性表達8例，陰性表達19例;16例Livin陰性表達的標本中，PTEN陽性表達12例，陰性表達4例

4、;二者呈負相關(guān)(r=-0.440，p=0.003)。
　　 結(jié)論:視網(wǎng)膜母細胞瘤組織中Livin的激活與PTEN的失活或缺失之間存在相互協(xié)同作用，共同參與了視網(wǎng)膜母細胞瘤的發(fā)生發(fā)展，提示視網(wǎng)膜母細胞瘤的形成是多基因、多因素共同作用的結(jié)果，聯(lián)合檢測Livin和PTEN可為視網(wǎng)膜母細胞瘤的診斷和治療提供必要的理論依據(jù)。
　　 第二部分、拓撲替康對視網(wǎng)膜母細胞瘤細胞增殖和凋亡的影響
　　 目的:在體外觀察拓撲替康(to

5、potecan，TPT)是否對人視網(wǎng)膜母細胞瘤Hxo-rb44細胞具有誘導凋亡和抑制增殖的作用，為探討拓撲替康應用于視網(wǎng)膜母細胞瘤的臨床化療提供理論基礎。
　　 方法:常規(guī)培養(yǎng)人視網(wǎng)膜母細胞瘤Hxo-rb44細胞株，加入不同濃度的拓撲替康，采用MTT法觀察不同濃度的拓撲替康在不同時間點對Hxo-rb44細胞增殖的影響，并計算其IC50值。應用流式細胞儀(flowcytometer, FCM)檢測不同濃度的拓撲替康作用不同時間后對

6、人視網(wǎng)膜母細胞瘤Hxo-rb44細胞株細胞凋亡的影響。
　　 結(jié)果:各濃度拓撲替康均能明顯抑制人視網(wǎng)膜母細胞瘤Hxo-rb44細胞的增殖，且拓撲替康對Hxo-rb44細胞增殖的抑制率隨濃度增高和時間延長而增加，且表現(xiàn)為明顯的劑量-效應依賴性和時間-效應依賴性。流式細胞術(shù)檢測結(jié)果提示，拓撲替康可明顯誘導人視網(wǎng)膜母細胞瘤Hxo-rb44細胞凋亡的發(fā)生，并且與藥物濃度以及作用時間呈依賴關(guān)系。
　　 結(jié)論:拓撲替康對人視網(wǎng)膜母細

7、胞瘤細胞株Hxo-rb44細胞具有誘導凋亡和抑制增殖的作用。
　　 第三部分、拓撲替康對視網(wǎng)膜母細胞瘤中Livin和PTEN表達的影響
　　 目的:在體外觀察拓撲替康是否具有影響Livin及PTEN表達的作用，探討視網(wǎng)膜母細胞瘤治療的機理，為今后拓撲替康應用于視網(wǎng)膜母細胞瘤的治療提供有力的理論基礎。
　　 方法:對人視網(wǎng)膜母細胞瘤細胞株Hxo-rb44進行培養(yǎng)傳代，用Westernblot（蛋白質(zhì)免疫印跡）法檢測