槚如酸對(duì)前列腺癌細(xì)胞株致死作用及類(lèi)似抗癌藥物篩選方法的研究.pdf

1、前列腺癌是歐美國(guó)家最常見(jiàn)的惡性腫瘤之一，是僅次于肺癌引起男性死亡的重要原因。我國(guó)的前列腺發(fā)病率較歐美國(guó)家低，但隨著國(guó)內(nèi)生活水平的改善，動(dòng)物性食物攝入增加和中國(guó)人口老齡化的出現(xiàn)，近幾年發(fā)病率有明顯上升趨勢(shì)。在我國(guó)上海等地區(qū)，前列腺癌已經(jīng)成為泌尿系統(tǒng)發(fā)病率最高的腫瘤。轉(zhuǎn)移性和晚期前列腺癌患者主要的治療是內(nèi)分泌治療，即去雄激素治療(ADT)。內(nèi)分泌治療對(duì)80％至90％的轉(zhuǎn)移性前列腺患者有效，但經(jīng)過(guò)平均周期為22個(gè)月的時(shí)間，會(huì)出現(xiàn)病情進(jìn)展，前列

2、腺癌從對(duì)激素依賴(lài)轉(zhuǎn)變?yōu)樾奂に胤且蕾?lài)性前列腺(androgen independent prostate cancer, AIPC)，最終進(jìn)展為激素抵抗性前列腺癌(hormonal refractory prostate cancer, HRPC)和去勢(shì)難治性型前列腺癌(Castrate-resistant prostate cancer, CRPC)并需要接受腫瘤化療。針對(duì)這些晚期前列腺癌的新的藥物和治療方案的研究一直是泌尿外科屆頗受重

3、視的領(lǐng)域。
　　我們?cè)陬A(yù)研究中發(fā)現(xiàn)了一種新的頗具潛力的治療前列腺癌的有效藥物槚如酸(anacardic acid，AA)。AA是一種應(yīng)用廣泛的中草藥提取物，屬于生命免疫制劑范疇，對(duì)腫瘤細(xì)胞具有特異性殺傷作用;能阻止癌細(xì)胞對(duì)毒害、免疫殺傷等產(chǎn)生抵抗的應(yīng)激反應(yīng)機(jī)制。對(duì)多種前列腺癌細(xì)胞株，包括LNCap和DU145細(xì)胞株具有致死作用，能誘導(dǎo)癌細(xì)胞凋亡，抑制增殖。AA的作用具有時(shí)間、劑量依賴(lài)關(guān)系。
　　我們通過(guò)實(shí)驗(yàn)驗(yàn)證了AA作用于前

4、列腺癌LNCap細(xì)胞株后，具有兩種新的抗癌作用機(jī)制:(1)AA抑制p300功能后通過(guò)p300/AR通路抑制雄激素受體AR的mRNA轉(zhuǎn)錄和蛋白表達(dá)。(2)AA通過(guò)增加p53在ser15位點(diǎn)的磷酸化修飾，轉(zhuǎn)錄非依賴(lài)性的增加p53基因的蛋白表達(dá);并進(jìn)一步通過(guò)p53/p21通路增加p21基因的mRNA轉(zhuǎn)錄和蛋白表達(dá)。
　　為進(jìn)一步在數(shù)量眾多的藥物庫(kù)和抗癌化合物中方便快捷地進(jìn)行批量篩選，發(fā)現(xiàn)更多類(lèi)似AA的調(diào)節(jié)p53蛋白水平的前列腺癌治療藥物

5、，從而進(jìn)行藥效的對(duì)比和觀察。我們通過(guò)實(shí)驗(yàn)構(gòu)建出一個(gè)新的，能適用于“高能量通道篩選技術(shù)”的雙熒光素酶報(bào)告質(zhì)粒（載體） p53FL/IRES/RL。通過(guò)驗(yàn)證該質(zhì)粒的生物學(xué)功能，證明該報(bào)告質(zhì)粒能順利應(yīng)用于“高通量藥物篩選技術(shù)”。使用該報(bào)告載體的實(shí)驗(yàn)方法能大大簡(jiǎn)化和縮短篩選類(lèi)似抗癌藥物的實(shí)驗(yàn)流程并節(jié)省費(fèi)用，具有廣泛的應(yīng)用前景。
　　本研究的創(chuàng)新點(diǎn)在于1）國(guó)內(nèi)外首次發(fā)現(xiàn)槚如酸通過(guò)影響p53/p21和p300/AR信號(hào)通道殺傷前列腺癌LYNc