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1、目的:察鞣花酸對(duì)人前列腺癌PC-3細(xì)胞株增殖抑制及誘導(dǎo)凋亡的作用,研究其對(duì)Caspase-3和NF-κB的表達(dá)的影響,探討鞣花酸對(duì)前列腺癌的作用及其可能機(jī)制,為鞣花酸的臨床應(yīng)用提供實(shí)驗(yàn)依據(jù)。 方法: 1.體外培養(yǎng)人前列腺癌PC-3細(xì)胞后,加入2.5μg/ml、5μg/ml、10μg/ml、20μg/ml的鞣花酸作用于PC-3細(xì)胞,并設(shè)置陰性對(duì)照組(即0μg/ml組),作用12、24和48小時(shí)后,MTT法測(cè)定各濃度組鞣花酸
2、對(duì)PC-3細(xì)胞的生長(zhǎng)抑制作用。 2.應(yīng)用流式細(xì)胞儀檢測(cè)不同濃度鞣花酸作用48小時(shí)后,PC-3細(xì)胞的周期時(shí)相變化及凋亡情況。 3.HE染色法觀察5ug/ml鞣花酸作用48小時(shí)后的細(xì)胞形態(tài)學(xué)變化。 4.免疫細(xì)胞化學(xué)檢測(cè)10ug/ml鞣花酸作用24小時(shí)后,實(shí)驗(yàn)組與對(duì)照組細(xì)胞Caspase-3, NF-κB的蛋白表達(dá)變化情況。 結(jié)果: 1.MTT比色法結(jié)果顯示:各處理組藥物均能抑制PC-3細(xì)胞生長(zhǎng),鞣花酸
3、對(duì)PC-3細(xì)胞的抑制作用呈時(shí)間和劑量依賴(lài)性,與對(duì)照組比較均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義,不同濃度鞣花酸處理組之間的兩兩比較顯示也有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義; 2.流式細(xì)胞儀檢測(cè)結(jié)果顯示,鞣花酸可將PC-3細(xì)胞阻滯于G1/S期并誘導(dǎo)PC-3細(xì)胞凋亡,且其阻滯率及凋亡率隨著藥物濃度的增加而升高。 3.HE染色法結(jié)果顯示,5ug/ml鞣花酸作用48小時(shí)后,出現(xiàn)細(xì)胞變圓,皺縮,細(xì)胞核固縮,染色質(zhì)濃集,邊聚,核碎裂等細(xì)胞凋亡的形態(tài)學(xué)變化。 4.免疫細(xì)胞
4、化學(xué)結(jié)果顯示,10ug/ml鞣花酸作用于PC-3細(xì)胞24小時(shí)后,與對(duì)照組相比,實(shí)驗(yàn)組Caspase-3蛋白表達(dá)明顯升高, NF-κB蛋白表達(dá)明顯降低。 結(jié)論: 1.鞣花酸對(duì)人前列腺癌細(xì)胞株P(guān)C-3的生長(zhǎng)具有明顯的生長(zhǎng)抑制作用,存在劑量和時(shí)間依賴(lài)關(guān)系。 2.鞣花酸可誘導(dǎo)前列腺癌PC-3細(xì)胞凋亡并可將前列腺癌細(xì)胞阻滯于G1/S期。 3.鞣花酸作用于PC-3細(xì)胞24小時(shí)后,細(xì)胞中Caspase-3蛋白表達(dá)明顯升
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