槲皮素對人乳腺癌MCF-7細(xì)胞生長抑制的特異性模式.pdf

1、目的:1.研究槲皮素對ERα(+)的人乳腺癌MCF-7細(xì)胞,ERα(-)人乳腺癌MDA-MB-231細(xì)胞,人鼻咽癌5-8F細(xì)胞和人肝癌Hep-G2細(xì)胞增殖的影響,并比較其差異。2.研究槲皮素對人乳腺癌MCF-7細(xì)胞增殖、細(xì)胞周期和細(xì)胞凋亡的影響。
　　方法:1.采用不同濃度組槲皮素(Hep-G2細(xì)胞和5-8F細(xì)胞,1.25、2.5、5、10、20μM;MDA-MB-231細(xì)胞,1.25、2.5、5、10、20、50μM;MCF-7

2、細(xì)胞,1.25、2.5、5、10、20、50、100、200μM)作用于體外培養(yǎng)的人乳腺癌MCF-7細(xì)胞、人乳腺癌MDA-MB-231細(xì)胞、人肝癌Hep-G2細(xì)胞、人鼻咽癌5-8F細(xì)胞,48h后MTT法測定槲皮素對四種腫瘤細(xì)胞增殖的影響。2.采用不同濃度組(1.25、2.5、5、10、20、50、100、200μM)槲皮素作用于體外培養(yǎng)的人乳腺癌MCF-7細(xì)胞,MTT法在不同時間收取細(xì)胞(24h和48h)測定槲皮素對人乳腺癌MCF-7細(xì)

3、胞增殖的影響,另外使用DAPI染色法觀察細(xì)胞核形態(tài)學(xué)改變,FCM法測定其細(xì)胞周期變化,AnnexinⅤ/PI雙染法檢測其細(xì)胞凋亡情況。
　　結(jié)果:1.槲皮素能夠明顯的抑制四種腫瘤細(xì)胞,其抑制增殖作用從低到高分別為人乳腺癌MCF-7細(xì)胞IC50=36.7μM、人乳腺癌MDA-MB-231細(xì)胞IC50=18.5μM、人鼻咽癌5-8F細(xì)胞IC50=7.9μM、人肝癌Hep-G2細(xì)胞IC50=6.1μM。其中槲皮素低濃度組(1.25μM組

4、)輕度促進(jìn)ERα(+)的人乳腺癌MCF-7細(xì)胞增殖,而對另外三種細(xì)胞無此效應(yīng)。2.槲皮素能夠明顯的抑制人乳腺癌MCF-7細(xì)胞生長,且48h的抑制效果大于24h的抑制效果。熒光顯微鏡下觀察,槲皮素20μM組細(xì)胞出現(xiàn)S期阻滯細(xì)胞形態(tài),槲皮素50μM組S期阻滯細(xì)胞減少,部分細(xì)胞出現(xiàn)凋亡形態(tài)學(xué)特征。槲皮素處理后,MCF-7細(xì)胞G1期細(xì)胞比例下降,S期細(xì)胞比例升高,當(dāng)濃度≥50μM出現(xiàn)G1期細(xì)胞比例回升,而S期比例有所下降。在AnnexinⅤ/P

5、I雙染法檢測其細(xì)胞凋亡結(jié)果中,隨著槲皮素濃度升高活細(xì)胞比例下降,濃度≥20μM出現(xiàn)顯著凋亡。這提示,低濃度組槲皮素使人乳腺癌MCF-7細(xì)胞發(fā)生S期阻滯,高濃度組槲皮素(≥50μM)則促進(jìn)其發(fā)生細(xì)胞凋亡。
　　結(jié)論:1.槲皮素對四種腫瘤細(xì)胞有不同程度的抑制作用;低劑量槲皮素組對MCF-7有弱促增殖效應(yīng),可能與MCF-7ERα(+)的遺傳背景有關(guān)。2.槲皮素能抑制人乳腺癌MCF-7細(xì)胞生長,且存在兩種機(jī)制:低濃度組以細(xì)胞S期阻滯為主,