熱休克反應(yīng)天然誘導(dǎo)物的篩選及其在防治化療脫發(fā)中的初探.pdf

1、目的：篩選出具有誘導(dǎo)熱休克反應(yīng)的天然中藥提取物，并對其機(jī)理進(jìn)行初步的研究；利用熱休克反應(yīng)的原理針對化療脫發(fā)開發(fā)出一種預(yù)防和治療化療脫發(fā)的新藥物及防治化療脫發(fā)的新方法。 方法：⑴通過MTT法、雙熒光素酶報(bào)告系統(tǒng)、免疫熒光和Western blot法篩選具有誘導(dǎo)熱休克反應(yīng)的中藥提取物。⑵初步研究篩選出的中藥提取物誘導(dǎo)熱休克反應(yīng)的機(jī)理。⑶利用依托泊苷構(gòu)建SD大鼠化療脫發(fā)模型。⑷利用熱激方法和熱休克反應(yīng)誘導(dǎo)劑格爾德霉素對化療脫發(fā)模型動物

2、進(jìn)行預(yù)防和治療化療脫發(fā)的實(shí)驗(yàn)。⑸在前者成功的基礎(chǔ)上進(jìn)行方法的改進(jìn)，并嘗試使用篩選出的中藥提取物進(jìn)行預(yù)防和治療化療脫發(fā)。 結(jié)果：①通過MTT法、雙熒光素酶報(bào)告系統(tǒng)、免疫熒光和Western blot法篩選出并驗(yàn)證了天然藥物成分穿心蓮內(nèi)酯具有誘導(dǎo)熱休克反應(yīng)的作用。②通過Western blot，免疫熒光和siRNA干擾等方法證明了穿心蓮內(nèi)酯是通過激活HSF1來起到誘導(dǎo)熱休克反應(yīng)的作用。③成功構(gòu)建SD大鼠的化療脫發(fā)模型。④能夠誘導(dǎo)熱休

3、克反應(yīng)的格爾德霉素和熱激處理后，在SD大鼠化療脫發(fā)模型上成功預(yù)防和治療了化療脫發(fā)，證明利用熱休克反應(yīng)防治化療脫發(fā)的可行性。⑤穿心蓮內(nèi)酯在體外實(shí)驗(yàn)證實(shí)能激發(fā)皮膚細(xì)胞的熱休克蛋白表達(dá)，但體內(nèi)實(shí)驗(yàn)結(jié)果無明顯預(yù)防和治療化療脫發(fā)的作用，改進(jìn)方法結(jié)果不理想。 結(jié)論：⑴爵床科植物穿心蓮中的提取物穿心蓮內(nèi)酯能夠通過激活HSF1來誘導(dǎo)熱休克蛋白表達(dá)，使機(jī)體產(chǎn)生熱休克反應(yīng)，從而起到各種保護(hù)和防御的生物學(xué)功能。⑵在SD大鼠動物模型上通過皮內(nèi)注射格爾德