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1、心肌營養(yǎng)素是一種多效性細(xì)胞因子，具有廣泛的生物學(xué)活性。為鑒定其生物學(xué)活性，本實驗在構(gòu)建pQE-CT1表達(dá)載體時插入FactorXa蛋白酶切位點，為獲得非融合蛋白提供一種思路；利用5L發(fā)酵罐系統(tǒng)，采用分批補(bǔ)料方法高密度培養(yǎng)M15[pQE-CT1]表達(dá)rhCT-1，收獲菌體濕重25.6g·L-1，rhCT-1表達(dá)量約占菌體總蛋白40％；通過Ni-NTA親和層析純化，利用含有還原型及氧化型谷胱甘肽的復(fù)性體系，恢復(fù)變性蛋白的天然構(gòu)象，獲得濃度為
2、0.4g·L-1的活性蛋白質(zhì)；利用異丙腎上腺素建立大鼠急性心肌缺血模型，rhCT-1能顯著減輕異丙腎上腺素所致大鼠心肌組織損傷，抑制損傷大鼠血清谷草轉(zhuǎn)氨酶(GOT)、磷酸肌酸激酶(CK-MB)、乳酸脫氫酶-1(LDH-1)活性，逆轉(zhuǎn)心肌組織中丙二醛(MDA)、一氧化氮(NO)含量的升高，提高大鼠心肌組織中超氧化物歧化酶(SOD)活性；通過MTT法比較不同酒精濃度和不同酒精損傷時間造成的肝細(xì)胞損傷，確定以50mmol/L酒精損傷8h作為肝
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