抗髓鞘少突膠質細胞糖蛋白抗體生物學特性研究.pdf

1、多發(fā)性硬化（Multiple Sclerosis，MS）是一種中樞神經系統(tǒng)自身免疫性疾病，細胞免疫一直被認為在MS的發(fā)病機制中發(fā)揮主要作用，然而近年來研究顯示體液免疫亦發(fā)揮著重要作用。在諸多髓鞘蛋白中，髓鞘少突膠質細胞糖蛋白（MyelinOligodendrocyte Glycoprotein，MOG）是唯一可以在MS的動物模型--實驗性自身免疫性腦脊髓炎（Experimental Autoimmune Encephalomyeliti

2、s，EAE）中同時誘導出致病性自身抗體與致腦炎T細胞反應的抗原，因而被認為是最有研究前景的靶抗原。然而自1999年開始有多項研究表明MS患者血清抗MOG抗體陽性率與健康對照之間并不存在顯著差異，于是研究者們推測抗MOG抗體有可能是一組抗體，包括致病性與非致病性兩大類，進而研究方向逐漸轉向如何鑒別這兩類抗體上。致病性與非致病性抗體是識別MOG不同表位的，有關致病性抗體識別表位的研究有三個主要方向，包括線性肽段表位、構象表位及糖基化表位，其

3、中線性肽段表位研究是目前研究的一個熱點。有關特異性線性表位研究在國外已有較多報道，但主要集中在EAE模型上，基于MS患者的特異性線性表位研究到目前為止只有三篇，且結論不一致。在國內，有關MS患者抗MOG抗體的研究至今還不多，特別是用MOG整蛋白作為抗原檢測抗體以及有關抗MOG抗體線性表位特異性方面的研究還是空白。因此檢測中國MS患者抗MOG整蛋白抗體并進行抗MOG抗體表位特異性的研究，可以將中國人群的抗MOG抗體在人群中的分布特點與國外

4、的數據進行比較，并且填補國內有關致病性抗MOG抗體線性表位特異性研究的空白。進一步認識我國MS患者的免疫學發(fā)病機制，尋找針對我國患者早期預測疾病進展、提示治療效果或評估預后的血清學標記物。
　　 目的：
　　 證實抗MOG抗體在中國人群中普遍存在，探究中國多發(fā)性硬化/視神經脊髓炎患者抗MOG抗體識別MOG蛋白的表位特異性。
　　 方法：
　　 1.臨床資料收集：自2009年4月至2010年4月期間，收集在

5、北京協和醫(yī)院神經內科門診就診或住院治療的MS/NMO患者67例（包括43例經典型多發(fā)性硬化cMS、10例視神經脊髓型多發(fā)性硬化OSMS及14例視神經脊髓炎NMO），和其他神經系統(tǒng)疾?。∣ther Non-inflammatory Neurological Diseases，ONND）患者60例，收集健康體檢中心健康對照77例，將上述3組人群進行年齡性別的匹配，入選者簽署知情同意書后采外周血，離心冷凍保存?zhèn)溆?。收集所有MS/NMO患者詳細

6、病史、體格檢查及EDSS評分、實驗室檢查、影像學檢查及治療方案等臨床資料。
　　 2.抗MOG整蛋白抗體檢測：應用酶聯免疫吸附（Enzyme-Linked ImmunosorbentAssay，EL，ISA）方法，以重組人MOG蛋白胞外段1-125aa為抗原檢測3組人外周血抗MOG抗體。
　　 3.抗MOG抗體表位特異性檢測：將MOG蛋白胞外段1～125氨基酸劃分為25個短肽進行人工合成，每個短肽為12個氨基酸，相鄰短肽

7、有7個氨基酸重疊，應用ELISA方法，檢測3組人抗MOG抗體識別MOG蛋白胞外段的表位特異性
　　 4.分析表位特異性抗MOG抗體與臨床資料之間的關聯。
　　 結果：
　　 1.MS/NMO、ONND及HC三組抗人MOG蛋白胞外段抗體無顯著差異（P>0.05）。cMS、OSMS及NMO三個疾病亞組抗人MOG蛋白胞外段抗體亦無顯著差異（P>0.05）。
　　 2.抗MOG12～23與抗MOG27～38抗體在

8、MS/NMO患者中顯著升高（P<0.01）。應用ROC曲線評估其臨床診斷價值顯示，抗MOG27～38抗體較抗MOG12～23抗體具有更好的臨床診斷價值。
　　 3.抗MOG97～108抗體在ONND組與HC組顯著升高（P<0.01）。
　　 4.抗MOG27～38抗體與臨床資料的關聯分析結果顯示：發(fā)作期MS/NMO患者抗MOG27～38抗體陽性率顯著高于緩解期患者（P<0.05）；MS/NMO總復發(fā)次數較高組（>3次）的

9、抗MOG27～38抗體陽性率顯著高于總復發(fā)次數較低組（<3次）（P<0.05）。
　　 5.在11例接受β1b干擾素治療的cMS患者中，抗MOG27～38抗體陽性患者應用干擾素治療后復發(fā)率低于抗MOG27～38抗體陰性患者，但目前例數較少尚未顯示出顯著差異。
　　 結論：
　　 1.抗MOG抗體在不同亞型脫髓鞘疾病患者、非炎性神經系統(tǒng)疾病患者及健康人中廣泛存在。
　　 2.人群外周血中抗MOG抗體存在表位