果糖自氧化體系在抗氧化活性組分篩選和評(píng)價(jià)中的應(yīng)用研究.pdf

1、隨著自由基生物學(xué)和醫(yī)學(xué)的發(fā)展,與自由基相關(guān)疾病的發(fā)生發(fā)展受到越來越多的關(guān)注。同時(shí),抗氧化劑在預(yù)防和治療這些疾病中發(fā)揮的作用也受到了廣泛的重視,因此抗氧化劑的研究工作已經(jīng)成為熱點(diǎn)。傳統(tǒng)抗氧化評(píng)價(jià)方法只能對(duì)其清除特定單一自由基的能力進(jìn)行測(cè)定和評(píng)價(jià),無法實(shí)現(xiàn)同時(shí)對(duì)多種自由基能力的全面評(píng)價(jià)。此外,抗氧化劑篩選研究的最終目的是要用于人體疾病的預(yù)防和治療中,而人體內(nèi)活性氧的產(chǎn)生是一個(gè)動(dòng)態(tài)復(fù)雜的轉(zhuǎn)變過程,目前所建立的抗氧化劑篩選體系都是單一靜態(tài)的體系

2、且每種方法都具有一定的局限性。因此,建立一種動(dòng)態(tài)的復(fù)雜的與人體體內(nèi)自由基轉(zhuǎn)變過程相似的抗氧化劑篩選體系具有很大的意義。
　　研究發(fā)現(xiàn),在過渡金屬離子的催化下,果糖與其他糖類,如葡萄糖、半乳糖相比,具有更快的自氧化速率和引發(fā)蛋白質(zhì)糖基化的能力,果糖在自氧化過程中能夠產(chǎn)生多種活性氧(O2-·、HO2-·、·OH),經(jīng)過一系列轉(zhuǎn)變最終生成·OH。鑒于果糖自氧化過程與人體內(nèi)活性氧的產(chǎn)生和轉(zhuǎn)變過程較為相似,本論文以果糖自氧化過程產(chǎn)生的活性氧

3、為基礎(chǔ),借助熒光分光光度法,根據(jù)果糖自氧化過程中產(chǎn)生的·OH能夠?qū)⒈郊姿嵫趸癁橛袕?qiáng)熒光物質(zhì)的羥基苯甲酸,而抗氧化劑能夠清除活性氧而抑制熒光強(qiáng)度的原理,建立了一種動(dòng)態(tài)的、能夠較為全面的抗氧活性評(píng)價(jià)方法,并利用該方法對(duì)幾種抗氧化標(biāo)準(zhǔn)品及麥冬不同溶劑提取物的抗氧化活性進(jìn)行了評(píng)價(jià)。本文的主要研究內(nèi)容和結(jié)果如下:
　?、俳⒐亲匝趸w系篩選和評(píng)價(jià)抗氧化活性的方法。首先對(duì)影響果糖自氧化過程的多種因素進(jìn)行單因素考察,然后在單因素考察的基礎(chǔ)上進(jìn)

4、行正交試驗(yàn),優(yōu)化了實(shí)驗(yàn)條件。
　　②采用已經(jīng)建立的體系,通過測(cè)定不同濃度的綠原酸、咖啡酸、原兒茶酸、兒茶酚、芥子酸、香草酸、4-香豆酸對(duì)果糖自氧化過程產(chǎn)生活性氧的清除能力,以IC50(半抑制濃度)為抗氧化活性的衡量標(biāo)準(zhǔn),對(duì)其抗氧化活性進(jìn)行了評(píng)價(jià)并初步探討了抗氧化活性與其結(jié)構(gòu)之間的關(guān)系。結(jié)果表明,實(shí)驗(yàn)所測(cè)抗氧化劑的抗氧化活性與其所含酚羥基數(shù)目、取代基種類和性質(zhì)及酚羥基能否與其他雜原子形成分子內(nèi)氫鍵有關(guān)。
　　③采用經(jīng)典的Fen

5、ton體系和鄰苯三酚自氧化體系,借助化學(xué)發(fā)光法,通過不同濃度的綠原酸、咖啡酸、原兒茶酸、兒茶酚、芥子酸、香草酸、4-香豆酸分別清除·OH和 O2-·能力的測(cè)定,以 IC50為抗氧化活性的衡量標(biāo)準(zhǔn),對(duì)其抗氧化活性進(jìn)行評(píng)價(jià),并與果糖自氧化體系的評(píng)價(jià)結(jié)果比較。結(jié)果僅僅從多酚類抗氧化劑抗氧化活性與其結(jié)構(gòu)間的關(guān)系來說,果糖自氧化體系要優(yōu)于Fenton體系和鄰苯三酚自氧化體系,能夠較為準(zhǔn)確的評(píng)價(jià)抗氧化劑的抗氧化活性。
　　④采用果糖自氧化體系