Survivin突變基因?qū)Ψ伟┘?xì)胞的凋亡作用.pdf_第1頁
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文檔簡介

1、目的 研究Survivin Thr<'34>→Ala突變基因?qū)Ψ伟〢549細(xì)胞株的凋亡作用;研究Survivin Thr<'34>→Ala突變基因?qū)Ψ伟?5C和95D細(xì)胞株的凋亡作用,為肺癌的基因治療開拓新的道路.方法 從肺癌A549細(xì)胞株中,用RT-PCR提取Survivin基因,構(gòu)建質(zhì)粒,并對其進(jìn)行定點(diǎn)突變,構(gòu)建Survivin Thr<'34>→Ala突變基因,轉(zhuǎn)染A549細(xì)胞株,培養(yǎng)24、48、72、96小時Hoechst凋亡染

2、色,熒光顯微鏡觀察測凋亡率;構(gòu)建C-末端長α螺旋區(qū)突變的Survivin Mutant-alpha和BIR區(qū)突變的Survivin Mutant-BIR-1、Survivin Mutant-BIR-2突變基因,轉(zhuǎn)染A549細(xì)胞株,Hoechst染色測凋亡率;肺癌95C、95D細(xì)胞株分別行Survivin免疫組化染色,并用Survivin Thr<'34>→Ala突變基因轉(zhuǎn)染95C和95D細(xì)胞,48小時后Hoechst染色.結(jié)論 Surv

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