高油酸花生種質(zhì)創(chuàng)制及ahFAD2A基因型效應(yīng)分析.pdf

1、花生是我國重要的油料作物和經(jīng)濟(jì)作物?；ㄉ退岷看嬖谪S富的遺傳變異。根據(jù)種子油酸含量和油亞比通常將花生分為高油酸、中等油酸和普通油酸。提高O/L值是花生品質(zhì)育種的目標(biāo)之一，國內(nèi)僅有少數(shù)高油酸育成品種，這與國外發(fā)達(dá)國家相比存在著比較大的差距。因此，高油酸花生育種是中國花生品質(zhì)育種既迫切又重要的任務(wù)。
　　種質(zhì)資源是作物育種的基礎(chǔ)，創(chuàng)制具有多種表型特征的高油酸花生新材料，對(duì)高油酸花生育種具有重要意義。本研究以常規(guī)品種白沙1016、遠(yuǎn)雜

2、9847、冀0212-2、海花1號(hào)和高油酸花生品系CTWE和GYS01為材料，通過雜交組配，分子和化學(xué)鑒定以及室內(nèi)考種以期獲得具有多種表型特征的高油酸花生新材料。利用AS-PCR分子標(biāo)記篩選每代的雙雜合子，對(duì)其進(jìn)行自交，構(gòu)建近等基因系并進(jìn)行基因型效應(yīng)分析。主要研究結(jié)果如下:
　　1、對(duì)6個(gè)親本ahFAD2A和ahFAD2B ORF的擴(kuò)增與序列分析。ahFAD2A和ahFAD2B ORF區(qū)域擴(kuò)增與序列測定結(jié)果表明，CTWE和GYS0

3、1與突變體F435的突變位點(diǎn)完全一致，即ahFAD2A在448 bp處發(fā)生G-A堿基替換，同時(shí)ahFAD2B在442bp處發(fā)生堿基A的插入。白沙1016、遠(yuǎn)雜9847、冀0212-2、海花1號(hào)在這2個(gè)位點(diǎn)保持野生型狀態(tài)。
　　2、利用等位基因特異性PCR(Allele-Specific PCR，AS-PCR)對(duì)6親本油酸性狀基因型進(jìn)行確認(rèn)。結(jié)果表明，CTWE和GYS01的基因型為為ol1ol1ol2ol2，白沙1016、遠(yuǎn)雜984

4、7、冀0212-2、?；?號(hào)的基因型為OL1OL1OL2OL2，6親本存在2對(duì)差異基因。該結(jié)果與測序結(jié)果相一致。
　　3、采用產(chǎn)量性狀和油酸性狀雙重選擇壓力對(duì)F2∶3家系進(jìn)行選擇，篩選到單株莢果重高于對(duì)照冀花2號(hào)30％以上的候選高油酸家系115個(gè)并采用AS-PCR對(duì)F2∶3個(gè)家系內(nèi)的所有單株進(jìn)行檢測，篩選出基因型為隱性的單株。通過對(duì)F3單株田間調(diào)查及對(duì)F4種子的考種并結(jié)合AS-PCR鑒定，最終篩選出基因型為ol1ol1ol2ol2

5、的F4高油酸材料，包括匍匐型38株，直立型28株，它們油酸含量介于77.98％-85.43％，O/L介于12.8-46.1，百仁重介于29.63 g-96.14 g。本研究在F6代選育出21個(gè)具有不同表型特征的高產(chǎn)、高O/L新品系，其中直立、大果型、高油酸品系7個(gè)，它們的油酸介于80.57％-83.36％，百仁重介于91.66 g-107.58 g，單株果重介于24.55 g-70.23 g。直立、中果型花生6個(gè)，它們的油酸含量介于80

6、.50％-82.47％，百仁重介于72.92 g-83.54 g，單株果重介于38.41 g-59.27 g。株型為匍匐型，屬于大果型高油酸花生的有4個(gè)，其中油酸含量介于80.40％-82.62％，百仁重介于81.32 g-86.31 g，單株果重介于40.68g-67.34 g。匍匐型中果型高油酸花生有4個(gè)。油酸含量介于80.67％-82.13％，百仁重介于66.19 g-79.17 g，單株果重介于58.07 g-84.83 g。<

7、br>　　4.在F6代檢測的464個(gè)單株中，共檢測出6種基因型，他們分別為OL1 ol1OL2 ol2、OL1OL1OL2ol2、ol1ol1OL2ol2、ol1ol1ol2ol2、OL1ol1ol2ol2和OL1OL1ol2ol2。對(duì)近等基因系的遺傳背景檢測，背景一致性達(dá)到93.58％。
　　5.根據(jù)基因型OL1OL1ol2ol2、OL1ol1ol2ol2和ol1ol1ol2ol2的油酸含量表明，OL1針對(duì)油酸的顯性效應(yīng)為-4.