川芎嗪對(duì)大鼠急性脊髓損傷模型巨噬細(xì)胞移動(dòng)抑制因子、核因子Kappa-B及抑制性卡巴蛋白-a表達(dá)的影響.pdf

1、目的：利用改良Allens打擊法建立大鼠急性脊髓損傷模型，觀察損傷段脊髓組織中巨噬細(xì)胞移動(dòng)抑制因子、核因子-Kappa B及抑制性卡巴蛋白-α的表達(dá)及川芎嗪干預(yù)對(duì)損傷段脊髓組織中MIF、NF-KB及I-KBα表達(dá)的影響。進(jìn)一步探討川芎嗪對(duì)急性脊髓損傷的保護(hù)作用及可能機(jī)制。 材料和方法：正常成年SD大鼠110只，隨機(jī)分成三組：（1）假手術(shù)組（S組，n=10）；（2）對(duì)照組（C組，n=50）；（3）實(shí)驗(yàn)組（T組，n=50）實(shí)驗(yàn)組和對(duì)

2、照組大鼠按術(shù)后動(dòng)物存活的時(shí)間再各分為1小時(shí)組，3小時(shí)組，6小時(shí)組，12小時(shí)組、1天組、3天組、5天組、7天組、14天組和21天組，共10個(gè)亞組，每亞組5只大鼠。采用改良Allens重物打擊法制作脊髓T10水平損傷模型100個(gè)。實(shí)驗(yàn)組（T組）大鼠傷后30分鐘后開始予川芎嗪注射液經(jīng)腹腔內(nèi)注射200mg/kg，每天給藥一次，存活時(shí)間少于5天者用藥至死，多于5天者用藥5天。對(duì)照組（C組）大鼠給予等量的生理鹽水經(jīng)腹腔內(nèi)注射，給藥次數(shù)和實(shí)驗(yàn)組相同。

3、在相應(yīng)時(shí)間點(diǎn)分別處死對(duì)應(yīng)大鼠獲取脊髓標(biāo)本。在每個(gè)脊髓標(biāo)本損傷中心橫行切片，分別作MIF、NF-KB及I一KBα的免疫組化染色，觀察各自的表達(dá)情況并計(jì)數(shù)，各組動(dòng)物的脊髓標(biāo)本不同時(shí)間點(diǎn)MIF、NF-KB及I-KBα的表達(dá)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析。此外，1天及超過1天處死的大鼠在處死前作改良Rivlin斜板實(shí)驗(yàn)、CBS評(píng)分和BBB評(píng)分，以此評(píng)測(cè)脊髓運(yùn)動(dòng)神經(jīng)功能。利用SPSS13.0統(tǒng)計(jì)分析軟件進(jìn)行兩獨(dú)立樣本的t檢驗(yàn)。 結(jié)果：術(shù)后1小時(shí)脊髓前角M

4、IF表達(dá)陽性細(xì)胞計(jì)數(shù)開始升高，對(duì)照組和實(shí)驗(yàn)組均在術(shù)后12小時(shí)達(dá)到高峰；術(shù)后12小時(shí)、1天、3天、5天和7天5個(gè)時(shí)間點(diǎn)上，MIF表達(dá)數(shù)對(duì)照組較實(shí)驗(yàn)組表達(dá)高，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05），其中術(shù)后5天和7天兩個(gè)時(shí)間點(diǎn)差異具有顯著統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.01）。 術(shù)后1小時(shí)脊髓前角NF-K B表達(dá)陽性細(xì)胞計(jì)數(shù)即顯著升高，對(duì)照組和實(shí)驗(yàn)組均在術(shù)后12小時(shí)即達(dá)高峰；術(shù)后1天、3天、5天和7天4個(gè)時(shí)間點(diǎn)上，實(shí)驗(yàn)組NF-K B表達(dá)數(shù)低于對(duì)照組，

5、差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05），其中術(shù)后5天和7天兩個(gè)時(shí)間點(diǎn)差異具有顯著統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.01）。 I-KBα剛好與NF-KB表達(dá)相反，術(shù)后1小時(shí)脊髓前角I-KBα表達(dá)陽性細(xì)胞計(jì)數(shù)即顯著下降，對(duì)照組和實(shí)驗(yàn)組均在術(shù)后12小時(shí)即達(dá)最低值；術(shù)后1天、3天、5天和7天4個(gè)時(shí)間點(diǎn)上，實(shí)驗(yàn)組I-KBα表達(dá)數(shù)高于對(duì)照組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05），其中術(shù)后5天和7天兩個(gè)時(shí)間點(diǎn)差異具有顯著統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.01）。 改良R

6、ivlin斜板實(shí)驗(yàn)，術(shù)后斜板臨界角度數(shù)均值隨時(shí)間點(diǎn)延長逐漸升高，實(shí)驗(yàn)組較對(duì)照組斜板臨界角度數(shù)高，術(shù)后7天、14天和21天時(shí)，兩組間斜板臨界角度數(shù)差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05），其中術(shù)后14天和21天兩個(gè)時(shí)間點(diǎn)差異具有顯著統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.01）。 BB評(píng)分，術(shù)后BBB評(píng)分均值隨時(shí)間點(diǎn)延長逐漸升高，實(shí)驗(yàn)組較對(duì)照組評(píng)分值高，術(shù)后5天、7天、14天和21天時(shí)，實(shí)驗(yàn)組和對(duì)照組差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05），其中術(shù)后14天和21天

7、兩個(gè)時(shí)間點(diǎn)差異具有顯著統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.01）。 CBS評(píng)分，術(shù)后CBS評(píng)分均值隨時(shí)間點(diǎn)延長逐漸降低，實(shí)驗(yàn)組較對(duì)照組評(píng)分值低，術(shù)后5天、7天、14天和21天時(shí)，實(shí)驗(yàn)組和對(duì)照組差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05），其中術(shù)后7天、14天和21天三個(gè)時(shí)間點(diǎn)差異具有顯著統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.01）。 結(jié)論：①川芎嗪對(duì)大鼠急性繼發(fā)性損傷的脊髓有保護(hù)和促進(jìn)其功能恢復(fù)的作用，這種作用在損傷后1周至2周最為顯著；②川芎嗪能夠促進(jìn)大鼠急性繼