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文檔簡(jiǎn)介
1、目的:研究鈣離子拮抗劑非洛地平對(duì)自發(fā)性高血壓大鼠(SHR)主動(dòng)脈平滑肌細(xì)胞增殖及平滑肌源性泡沫細(xì)胞形成的影響及其抗動(dòng)脈粥樣硬化分子機(jī)制,并進(jìn)行動(dòng)物實(shí)驗(yàn)研究非洛地平和硝苯地平對(duì)SHR腎臟保護(hù)作用。
方法:用oxLDL干預(yù)SHR血管平滑肌細(xì)胞(VSMC),利用細(xì)胞計(jì)數(shù)和水溶性四氮唑鹽法(CCK8)比較不同濃度非洛地平抑制平滑肌細(xì)胞增殖作用;利用油紅0染色比較不同濃度非洛地平抑制平滑肌細(xì)胞泡沫化效果;Westernblot分析非洛地
2、平抗動(dòng)脈粥樣硬化的分子機(jī)制。動(dòng)物實(shí)驗(yàn)將30只16周齡雄性SHR隨機(jī)分為SHR組、Felodipine組、Nifedipine組。運(yùn)用鼠尾動(dòng)脈測(cè)壓儀每4周測(cè)尾動(dòng)脈壓1次,實(shí)驗(yàn)結(jié)束經(jīng)頸總動(dòng)脈測(cè)壓;留取腎臟組織,切片行蘇木素-伊紅(HE)染色觀(guān)察腎小球病理變化;Masson染色觀(guān)察腎臟纖維化情況。
結(jié)果:oxLDL干預(yù)平滑肌細(xì)胞12h后可以形成肌源性泡沫細(xì)胞。細(xì)胞計(jì)數(shù)和水溶性四氮唑鹽法顯示非洛地平可以抑制大鼠血管平滑肌細(xì)胞增殖,并呈
3、濃度依賴(lài)性(p<0.05);油紅染色方法顯示非洛地平可以抑制平滑肌細(xì)胞泡沫化,并呈濃度依賴(lài)性(p<0.05)。WesternBlot結(jié)果表明非洛地平可以顯著抑制oxLDL干預(yù)的大鼠血管平滑肌細(xì)胞p-ERK1/2表達(dá)水平,升高PPARγ、ABCA1蛋白表達(dá)水平(p<0.05)。動(dòng)物實(shí)驗(yàn)第4周,SHR組尾動(dòng)脈壓明顯高于Felodipine組和Nifedipine組(P<0.05);實(shí)驗(yàn)結(jié)束,SHR組頸動(dòng)脈壓亦明顯高于Felodipine組和
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