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文檔簡介
1、目的：探討旋復(fù)代赭湯對大鼠胃平滑肌細(xì)胞收縮及信號轉(zhuǎn)導(dǎo)通路的影響。 方法：制備旋復(fù)代赭湯含藥血清和空白對照血清。采用膠原酶消化法分別從大鼠胃體、胃竇、幽門中分離出單個(gè)的游離大鼠胃平滑肌細(xì)胞(GSMC)，觀察旋復(fù)代赭湯對大鼠胃平滑肌細(xì)胞的收縮效應(yīng)，并觀察旋復(fù)代赭湯在分別加入磷脂酶C(PLC)抑制劑 U-73122、三磷酸肌醇受體(IP<,3>R)拮抗劑肝素、胞內(nèi)鈣阻斷劑 TMB-8 后對大鼠胃竇平滑肌細(xì)胞收縮效應(yīng)的影響。采用原代培養(yǎng)
2、的方法培養(yǎng)大鼠胃平滑肌細(xì)胞，采用免疫細(xì)胞化學(xué)法觀察旋復(fù)代赭湯對大鼠胃平滑肌細(xì)胞中蛋白激酶C(PKC)蛋白表達(dá)的影響，采用原位雜交的方法觀察旋復(fù)代赭湯對大鼠胃平滑肌細(xì)胞中CCK<,B>/GASRmRNA、VIPR2mRNA、IP<,3>R mRNA表達(dá)的影響。 結(jié)果： 1．旋復(fù)代赭湯含藥血清可引起大鼠胃平滑肌細(xì)胞明顯的收縮。 2．PLC 抑制劑 U-73122、三磷酸肌醇受體拮抗劑肝素、胞內(nèi)鈣釋放阻斷劑TMB-8可
3、以一定程度抑制旋復(fù)代赭湯含藥血清對胃竇平滑肌細(xì)胞收縮作用。 3．旋復(fù)代赭湯含藥血清可以升高胃平滑肌細(xì)胞 GASRmRNA 的表達(dá)，降低VIPR2mRNA的表達(dá)。 4．旋復(fù)代赭湯含藥血清可以升高胃平滑肌細(xì)胞PKC的蛋白表達(dá)。 5．旋復(fù)代赭湯含藥血清可以升高胃平滑肌細(xì)胞IP<,3>RmRNA的表達(dá)。 結(jié)論： (1)旋復(fù)代赭湯可引起大鼠胃平滑肌細(xì)胞明顯的收縮。 (2)旋復(fù)代赭湯通過興奮CCK<,
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