小鼠胃癌模型中T淋巴細胞與NK細胞的改變.pdf

1、目的：
　　本研究通過建立胃癌小鼠模型，檢測小鼠脾臟中T淋巴細胞、CD4+CD25+調(diào)節(jié)性T細胞（Treg）、自然殺傷（NK）細胞活化受體NKG2D的表達水平和NK細胞的殺傷活性，探討T淋巴細胞、調(diào)節(jié)性T細胞和NK細胞活化受體NKG2D在胃癌發(fā)展過程中的變化以及在腫瘤免疫逃逸機制中的作用。
　　方法：
　　1.通過615小鼠頸背部皮下種植不同濃度的小鼠前胃癌（MFC）細胞株建立胃癌小鼠模型，建模后經(jīng)病理學(xué)檢驗。

2、　　2.建模成功后，小鼠分為胃癌組（n=20）和正常組(n=20)，取小鼠脾細胞，制成懸液，采用流式細胞儀檢測小鼠脾臟T淋巴細胞及CD4+CD25+Treg的含量；并用RT-PCR法檢測Treg細胞特異性標(biāo)志物Foxp3 mRNA基因的相對表達量；
　　3.同法，取小鼠脾細胞懸液，用流式細胞儀檢測NK細胞活化受體NKG2D的表達水平；脾淋巴細胞作為效應(yīng)細胞，Yac-1作為靶細胞（小鼠NK細胞的靶細胞，其細胞表面無MHC-I類分子表

3、達），用LDH酶法檢測共培養(yǎng)后NK細胞的免疫活性。
　　結(jié)果：
　　1.所有小鼠皮下種植MFC細胞株均可成瘤。
　　2.胃癌組小鼠脾CD3+T、CD8+T較正常組升高有統(tǒng)計學(xué)意義（P<0.05）；CD4+T/CD8+T細胞比值較正常組降低有統(tǒng)計學(xué)意義（P<0.05）。
　　3.胃癌組小鼠脾Treg細胞及其特異性蛋白Foxp3的表達量較正常組升高，有統(tǒng)計學(xué)意義（P<0.05）。
　　4.胃癌組小鼠脾NK細胞表

4、面活性受體NKG2D的表達水平及NK細胞殺傷活性較正常組降低，有統(tǒng)計學(xué)意義（P<0.05）。
　　結(jié)論：
　　1.615小鼠皮下種植小鼠前胃癌細胞能成功建立胃癌小鼠模型。
　　2.在胃癌發(fā)展過程中，胃癌細胞所引起的細胞免疫造成T細胞總數(shù)和CD8+T細胞水平升高，CD4+T細胞的比例會降低，從而引起CD4+T/CD8+T細胞比值降低。
　　3.在胃癌發(fā)展過程中，Treg細胞水平及其特異性蛋白Foxp3的表達量升高，