T淋巴細(xì)胞介導(dǎo)小鼠肝纖維化模型的建立及初步應(yīng)用.pdf

1、目的：通過不同途徑多次給小鼠注射ConA，反復(fù)引起T細(xì)胞介導(dǎo)的肝細(xì)胞損傷，最終建立小鼠肝纖維化模型。在造模時(shí)和成模后分別用p-胡蘿卜素干預(yù)，觀察β-胡蘿卜素對(duì)實(shí)驗(yàn)小鼠肝纖維化有無預(yù)防和治療作用。 方法： 第一階段： 分別以10mg／kg、12.5mg／kg、15mg／kg劑量的ConA，每周一次靜脈注射Balb／c小鼠，對(duì)照組注射PBS，每次注射24小時(shí)后取尾靜脈血測ALT、AST，于第5、7、9周分批處死小鼠

2、測血清透明質(zhì)酸(HA)，肝臟組織作HE及Masson染色。 第二階段： 以20 mg／kg劑量的ConA每周一次腹腔注射昆明小鼠，對(duì)照組注射PBS，每次注射24小時(shí)后測ALT、AST，實(shí)驗(yàn)組分別于第7、8、9、10周分批處死小鼠，肝臟組織作HE及Masson染色。 第三階段： 分3組，未防治組建立昆明小鼠肝纖維化模型。β-胡蘿卜素預(yù)防組在開始建模時(shí)就予β-胡蘿卜素灌胃。前兩組于成模后處死，測血清ALT、AST，肝組織

3、作HE及Masson染色。β-胡蘿卜素治療組在造模成功后每周予β-胡蘿卜素灌胃，于成模后1、2、3、4、5周處死小鼠檢測指標(biāo)同前。 結(jié)果： 第一階段：Con A組每次注射后ALT、AST都明顯高于對(duì)照組，而且劑量越大增高越明顯。實(shí)驗(yàn)中Con A劑量越大小鼠血清HA水平越高；同一劑量時(shí)HA水平隨注射次數(shù)增加而升高，最終明顯高于正常。病理顯示10mg／kg組第7周開始出現(xiàn)肝纖維化，但不明顯；12.5mg／kg組第5周出現(xiàn)，第

4、7周有典型肝纖維化；15 mg／kg組第5周出現(xiàn)肝纖維化，但該組小鼠死亡率高。 第二階段：實(shí)驗(yàn)組注射ConA后ALT、AST都明顯高于對(duì)照組，病理顯示第9周出現(xiàn)典型肝纖維化。 第三階段：未防治組有典型肝纖維化；β-胡蘿卜素預(yù)防組未出現(xiàn)肝纖維化；β-胡蘿卜素治療組ALT、AST隨時(shí)間逐漸下降，治療后4周基本正常，病理顯示治療5周后肝纖維化消失。 結(jié)論：1.以12.5mg／kg劑量的ConA每周一次靜脈注射Balb/