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1、目的:觀察NGF對(duì)CCL4誘導(dǎo)的小鼠肝纖維化的影響,并初步探討其在抗肝纖維化中的作用機(jī)制。
方法:利用CCL4誘導(dǎo)形成小鼠肝纖維化模型。將30只雌性昆明小鼠隨機(jī)分組,每組10只,即:纖維化模型組(A組)、神經(jīng)生長(zhǎng)因子干預(yù)組(B組)和正常組(C組)。8周時(shí)采集標(biāo)本,采用全自動(dòng)生化分析儀檢測(cè)血清標(biāo)本肝功能指標(biāo)ALT、AST、TBIL、ALB;放射免疫法檢測(cè)肝纖維化指標(biāo)HA、LN、PCIII、IVC。肉眼及組織病理形態(tài)學(xué)法(常規(guī)HE
2、染色、網(wǎng)狀纖維染色及masson染色)觀察肝組織標(biāo)本,并采用Ishaki評(píng)分系統(tǒng)對(duì)小鼠肝組織炎癥活動(dòng)度及纖維化程度進(jìn)行評(píng)分。半定量RT-PCR分析Bax基因在小鼠肝組織中的表達(dá)情況。實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)用SPSS18.0統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行分析處理。
結(jié)果:成功建立小鼠肝纖維化模型,表現(xiàn)為匯管區(qū)周圍纖維化明顯,有芒狀纖維和纖維間隔形成。血生化檢測(cè):A、B組ALT、AST均顯著高于C組(F值分別為111.45,658.80;均P<0.05),B組A
3、LT、AST均明顯低于A組(均P<0.05);TBIL、ALB均無明顯升高,差異無顯著性(P>0.05)。肝纖指標(biāo):HA、LN:A、B組顯著高于C組,A組顯著高于B組,各實(shí)驗(yàn)組之間均有顯著性差異(P<0.05);PCIII檢測(cè):A、B組無明顯升高,C組未測(cè)出;IVC檢測(cè):A、B、C組均未測(cè)出。組織病理:HE染色、網(wǎng)狀纖維染色及Masson染色顯示,A組肝組織炎癥及纖維化程度最明顯,B組肝組織炎癥較A組顯著減輕,未形成纖維間隔,纖維組織細(xì)
4、短,C組肝組織未見明顯炎癥細(xì)胞浸潤(rùn)及纖維形成。Ishaki系統(tǒng)評(píng)分:肝臟炎癥分級(jí)A組中(7-9)分3只,(10-14)分6只,(15-18)分1只;B組(4-6)分2只,(7-9)分7只,(10-14)分1只;C組(0-3)分10只;A、B兩組炎癥活動(dòng)度得分有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P<0.05)。肝纖維化分期A組中3分2只,4分2只,5分4只,6分2只;B組2分1只,3分6只,4分3只;C組0分7只,1分3只;A、B兩組纖維化得分有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P
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