甘草次酸對小鼠CCl4性肝纖維化的防治作用及機(jī)制研究.pdf

1、目的：通過CCl4皮下注射誘導(dǎo)小鼠肝纖維化模型，探討CCl4對小鼠肝纖維化及其體內(nèi)氧化與抗氧化系統(tǒng)平衡的影響及三者之間的關(guān)系;采用不同劑量甘草次酸(GA)治療，通過觀察相關(guān)生化指標(biāo)、肝臟核因子NF-E2相關(guān)因子(Nrf2)及其下游目的基因的表達(dá)情況和GA的體外抗氧化性，探討GA治療肝纖維化的量效關(guān)系，并進(jìn)一步探討其治療機(jī)制。
　　 方法：將48只昆明小鼠按體重對等原則隨機(jī)分為Cont、CCl4、Sil、GA25，GA50，GA1

2、00組6組，除Cont組外，其余各組均采用CCl4油溶液皮下注射，6.4 g/kg/次，每隔5天1次，連續(xù)注射5次，首劑加倍。在首次皮下注射次日開始灌胃給藥，Cont組和CCl4組給予等量單蒸水，連續(xù)30 d，停藥次日開始取材。通過測定相關(guān)生化指標(biāo)及病理分析，采用western blot法檢測肝組織Nrf2蛋白的核內(nèi)和胞漿表達(dá)量，RT-PCR法檢測Nrf2下游目的基因（gpx2/cat/sod3）的表達(dá)，通過體外抗氧化實驗檢測GA的體外

3、抗氧化能力。
　　 結(jié)果：CCl4組表現(xiàn)為肝臟系數(shù)、血清GOT、GPT、MAO以及肝勻漿MAO和MDA升高，肝勻漿SOD、GSH-Px、CAT三個抗氧化酶活力降低，病理分析表現(xiàn)嚴(yán)重的肝細(xì)胞壞疽和纖維化病變，病理評分值亦為最高，核內(nèi)以及胞漿的Nrf2以及其下游目的基因表達(dá)量降低，這些數(shù)值與Cont組比較具有統(tǒng)計學(xué)差異(P＜0.05);而Sil組和GA各劑量組均能不同程度降低血清GOT、GPT、MAO以及肝勻漿MAO和MDA含量，增

4、強(qiáng)抗氧化酶活力，增強(qiáng)核內(nèi)Nrf2及其下游目的基因表達(dá)，緩解肝纖維化病理損傷;其中GA50的藥效較好，其所有指標(biāo)與CCl4組比較均有明顯差異（P＜0.05）;體外抗氧化實驗數(shù)據(jù)顯示，GA在體外具有清除[DPPH·]和抑制MDA生成的能力，并具有一定量效關(guān)系。
　　 結(jié)論：各項生化指標(biāo)及病理分析顯示，CCl4復(fù)制小鼠肝纖維化模型成功，GA各劑量組具有不同程度緩解纖維化的作用，其中GA50療效較好;通過觀察各組生化指標(biāo)、蛋白和mRNA