丁香酚對鯉魚中樞神經(jīng)NO-cGMP等信號轉(zhuǎn)導(dǎo)影響的研究.pdf

1、魚類因其獨特的生理特點，對臨床麻醉要求極高。研制出新型的效果好、麻醉時間長、蘇醒快，藥物殘留少，對人和魚安全、廉價的魚類麻醉劑是解決這一問題的有效途徑，通過考察丁香酚麻醉鯉魚后對中樞神經(jīng)系統(tǒng)中跨膜信號轉(zhuǎn)導(dǎo)系統(tǒng)的兩種ATP酶和NOS活性的影響，以及對腦組織中NO含量、cAMP和cGMP濃度的影響，探討其發(fā)揮全麻作用的分子機制，為高效、安全的魚類麻醉劑開發(fā)和麻醉學(xué)發(fā)展提供參考。
　　1、36尾鯉魚，體重為900 g～1000 g，分為

2、6組，每組6尾，水溫20～22℃，試驗重復(fù)5次，分別置于丁香酚乳劑的溶液中進行最佳麻醉濃度的研究，結(jié)果表明：達到麻醉期所用的時間和丁香酚的濃度成反比，其復(fù)蘇時間和丁香酚濃度成正比。體重在900 g～1000 g的鯉魚，丁香酚乳劑對其最佳麻醉濃度為40 mg/L。
　　2、將160尾鯉魚隨機分為4組，其中40尾為對照組，將其余120尾置于40 mg/L丁香酚乳劑溶液中麻醉，分別取誘導(dǎo)時期、麻醉時期和恢復(fù)時期鯉魚各腦組織和脊髓，通過分

3、光光度法測定其Na+-K+-ATP酶和Ca2+-Mg2+-ATP酶的活性。結(jié)果：丁香酚麻醉后不同麻醉時期鯉魚各腦組織和脊髓中兩種酶的活性均不同程度的下降，丁香酚對魚腦和脊髓中兩種酶的抑制作用隨麻醉的加深而加強，并在麻醉期時抑制作用最強。與對照組比較各腦組織和脊髓在麻醉期的Na+-K+-ATP酶活力均極顯著降低（P<0.01）。大腦、中腦、小腦、間腦和脊髓中Ca2+-Mg2+-ATP酶活力也極顯著降低（P<0.01），延腦中Ca2+-Mg

4、2+-ATP酶活力顯著降低（P<0.05）?；謴?fù)期時，兩種酶活力升高，大腦、中腦、小腦和脊髓中酶活力極顯著的高于麻醉期（P<0.01），但均低于對照組，且兩種酶活性變化的趨勢與麻醉深度的變化相一致。結(jié)論：丁香酚可明顯抑制鯉魚各腦組織和脊髓中兩種酶的活性，提示丁香酚對鯉魚的麻醉可能與其抑制 Na+-K+-ATP酶和Ca2+-Mg2+-ATP酶的活性有關(guān)。
　　3、應(yīng)用同樣麻醉和樣品采集處理方法，采用ELISA方法測定不同麻醉時期鯉魚

5、各腦組織和脊髓中cAMP的濃度。結(jié)果：鯉魚大腦、中腦、間腦、延腦和脊髓中cAMP濃度隨著麻醉程度的加深呈增高趨勢，與對照組比較各腦組織和脊髓中濃度均極顯著增高（P<0.01），并在麻醉期時濃度最高。恢復(fù)期時，cAMP濃度下降，大腦、中腦、間腦和延腦中的cAMP濃度極顯著低于麻醉期（P<0.01）。間腦cAMP濃度降低程度最大，極顯著地低于對照組（P<0.01），而大腦、中腦、延腦和脊髓中cAMP濃度仍未恢復(fù)，其仍極顯著高于對照組（P<0

6、.01）。提示：鯉魚大腦、中腦、間腦、延腦和脊髓中cAMP可能參與了丁香酚產(chǎn)生麻醉的調(diào)控過程。
　　4、應(yīng)用同樣麻醉和樣品采集處理方法，采用ELISA方法測定不同麻醉時期鯉魚各腦組織和脊髓中cGMP的濃度。結(jié)果：經(jīng)丁香酚麻醉后不同麻醉時期鯉魚各腦組織和脊髓中cGMP濃度均不同程度的下降，丁香酚降低魚腦組織和脊髓中cGMP濃度的作用隨麻醉的加深而加強，與對照組比，麻醉期小腦、間腦和脊髓中cGMP濃度極顯著下降（P<0.01），大腦、

7、中腦和延腦顯著下降（P<0.05）?；謴?fù)期時，各腦組織中cGMP濃度升高，小腦和脊髓中顯著高于麻醉期（P<0.01），脊髓幾乎恢復(fù)到對照組水平，其余各腦均低于對照組。
　　5、應(yīng)用同樣麻醉和樣品采集處理方法，通過分光光度法測定鯉魚各腦組織和脊髓中NO含量、NOS活性和iNOS活性，結(jié)果：丁香酚可明顯降低鯉魚大腦、中腦、小腦、間腦和脊髓中NO含量（P<0.05），明顯抑制NOS和iNOS活性（P<0.05）。丁香酚麻醉機制可能與抑制