硒對慢性肝炎患者外周血樹突狀細胞功能影響.pdf

1、目的：通過體外培養(yǎng)誘導慢性乙型肝炎患者外周血樹突狀細胞，檢測其經(jīng)過亞硒酸鈉作用后谷胱苷肽過氧化物酶(GSH-Px)、丙二醛(MDA)的活性及細胞因子IL-12表達和刺激自身淋巴細胞增殖反應的能力，觀察DC的體外抗病毒作用，探討慢性肝炎患者樹突狀細胞功能的改變及機制，尋求改善樹突狀細胞功能的途徑。 方法：(1)建立用重組人GM-CSF、重組人IL-4、重組人IFN-口等細胞因子誘生，無血清培養(yǎng)基AIM-V培養(yǎng)慢性乙型肝炎患者、健康

2、獻血者外周血單個核細胞的方法。(2)收集慢性乙肝患者20例外周血，每份血分成2份，其樹突狀細胞在誘生過程中不加亞硒酸鈉處理為乙肝組，加硒者為加硒組。健康獻血者8例為對照組。(3)用流式細胞儀檢測CD86、CD80,免疫組織化學(SP法)檢測HLA-DR等表面分子的表達；瑞氏染色、透射及掃描電鏡觀察其形態(tài)；MTT法檢測DC對同種異體淋巴細胞的增殖能力(MLR)及ELISA法檢測細胞因子IL-12的分泌。(4)用比色法檢測3組DC內(nèi)GSH-

3、Px、MDA的活性。(5)將3組的DC作用自身淋巴細胞后再與HePG2．2.15細胞共培養(yǎng)24h、48h、72h,ELISA法分別檢測HBsAg、HBeAg的分泌。 結(jié)果：(1)用無血清培養(yǎng)基培養(yǎng)和細胞因子誘生出的細胞經(jīng)形態(tài)學、細胞表面分子和功能檢測3方面鑒定可以得到數(shù)量較多的樹突狀細胞。(2)DC分泌IL．12水平和刺激自身淋巴細胞反應能力：乙肝組明顯低于對照組(P<0．05)；加硒組比乙肝組高(P<0．05)。(3)DC細胞

4、內(nèi)的GSH-Px、MDA的活性。GSH-Px活性乙肝組明顯低于對照組(P