硒對(duì)慢性肝炎患者外周血樹突狀細(xì)胞功能影響.pdf

1、目的：通過體外培養(yǎng)誘導(dǎo)慢性乙型肝炎患者外周血樹突狀細(xì)胞，檢測(cè)其經(jīng)過亞硒酸鈉作用后谷胱苷肽過氧化物酶(GSH-Px)、丙二醛(MDA)的活性及細(xì)胞因子IL-12表達(dá)和刺激自身淋巴細(xì)胞增殖反應(yīng)的能力，觀察DC的體外抗病毒作用，探討慢性肝炎患者樹突狀細(xì)胞功能的改變及機(jī)制，尋求改善樹突狀細(xì)胞功能的途徑。 方法：(1)建立用重組人GM-CSF、重組人IL-4、重組人IFN-口等細(xì)胞因子誘生，無血清培養(yǎng)基AIM-V培養(yǎng)慢性乙型肝炎患者、健康

2、獻(xiàn)血者外周血單個(gè)核細(xì)胞的方法。(2)收集慢性乙肝患者20例外周血，每份血分成2份，其樹突狀細(xì)胞在誘生過程中不加亞硒酸鈉處理為乙肝組，加硒者為加硒組。健康獻(xiàn)血者8例為對(duì)照組。(3)用流式細(xì)胞儀檢測(cè)CD86、CD80,免疫組織化學(xué)(SP法)檢測(cè)HLA-DR等表面分子的表達(dá)；瑞氏染色、透射及掃描電鏡觀察其形態(tài)；MTT法檢測(cè)DC對(duì)同種異體淋巴細(xì)胞的增殖能力(MLR)及ELISA法檢測(cè)細(xì)胞因子IL-12的分泌。(4)用比色法檢測(cè)3組DC內(nèi)GSH-

3、Px、MDA的活性。(5)將3組的DC作用自身淋巴細(xì)胞后再與HePG2．2.15細(xì)胞共培養(yǎng)24h、48h、72h,ELISA法分別檢測(cè)HBsAg、HBeAg的分泌。 結(jié)果：(1)用無血清培養(yǎng)基培養(yǎng)和細(xì)胞因子誘生出的細(xì)胞經(jīng)形態(tài)學(xué)、細(xì)胞表面分子和功能檢測(cè)3方面鑒定可以得到數(shù)量較多的樹突狀細(xì)胞。(2)DC分泌IL．12水平和刺激自身淋巴細(xì)胞反應(yīng)能力：乙肝組明顯低于對(duì)照組(P<0．05)；加硒組比乙肝組高(P<0．05)。(3)DC細(xì)胞

4、內(nèi)的GSH-Px、MDA的活性。GSH-Px活性乙肝組明顯低于對(duì)照組(P