Polyl：C刺激對慢性乙型肝炎患者外周血樹突狀細(xì)胞分泌Ⅰ型干擾素的影響.pdf

1、目的： 通過觀察慢性乙型肝炎患者外周血樹突狀細(xì)胞(Dendritic Cells，DC)在Toll樣受體3(Toll like receptor 3，TLR3)被配體PolyI：C觸發(fā)后分泌Ⅰ型干擾素的規(guī)律，探討HBV感染在DC功能障礙中的作用機(jī)制。 方法： 隨機(jī)篩選慢性乙型肝炎患者10例，入選時(shí)予PCR法測定外周血HBV DNA載量。從患者外周血分離獲取單核細(xì)胞，誘導(dǎo)培養(yǎng)DCs，對成熟期DCs用PolyI：C(

2、50 mg/ml)刺激，然后收集各時(shí)段上清。利用ELISA方法進(jìn)行DCs分泌干擾素α和干擾素β濃度的測定。同時(shí)以10例健康人作對照。 結(jié)果： 1、應(yīng)用AIM-V無血清培養(yǎng)基培養(yǎng)樹突狀細(xì)胞，細(xì)胞可以正常增殖。 2、DCs在體外經(jīng)PolyI：C的刺激，可以分泌少量的α干擾素。CHB患者刺激組在刺激后0、1、4、8、16、24、48小時(shí)DCs培養(yǎng)液上清測得的IFN-α濃度分別為(0.12±0.32、0.16±0.36、

3、1.66±0.96、12.22±2.44、9.85±1.49、7.96±2.58、8.59±2.58)pg/ml；健康刺激組測得值為(2.87±4.41、4.21±2.10、3.91±1.79、10.96±4.27、8.92±3.49、10.23±3.39、5.35±1.62)pg/ml，峰濃度無顯著性差異，但是CHB患者組維持時(shí)間短。 3、DCs在體外經(jīng)PolyI：C的刺激，CHB患者刺激組在刺激后0、1、4、8、16、24、

4、48小時(shí)DCs培養(yǎng)液上清測得的IFN-β濃度分別為(25.03±9.01、27.05±4.69、30.45±8.61、32.10±2.89、32.85±12.28、29.70±6.93、25.37±4.14)pg/ml；健康刺激組測得值分別為(12.38±3.71、36.93±3.81、40.55±4.92、33.30±5.07、32.10±5.80、26.10±4.11、24.77±4.12)pg/ml。CHB患者DCs在TLR3配體

5、觸發(fā)后分泌β干擾素的能力較健康刺激組明顯下降(p<0.05)。 4、CHB患者血漿中IFN-α濃度為(73.97±37.27)pg/ml明顯高于正常人(24.90±14.28)pg/ml，有顯著性差異(p<0.01)，而CHB患者血漿IFN-β濃度(121.96±17.23)pg/ml 明顯低于正常人(237.67±41.73)pg/ml，有顯著性差異(p<0.01) 結(jié)論： 1、AIM-V培養(yǎng)液可以滿足樹突狀細(xì)