液相色譜-電化學(xué)檢測(cè)在內(nèi)源性神經(jīng)毒素對(duì)帕金森病神經(jīng)元損傷機(jī)理中的應(yīng)用研究.pdf

1、近年來(lái),隨著生命科學(xué)的迅速發(fā)展,對(duì)生物樣品信息的準(zhǔn)確分析至關(guān)重要,但生物樣品成份復(fù)雜,含量又往往很低,因此許多傳統(tǒng)的、常規(guī)的分析方法與手段已不能滿足這個(gè)領(lǐng)域研究的需要。液相色譜-電化學(xué)檢測(cè)聯(lián)用技術(shù),作為分析化學(xué)的一個(gè)分支,由于其具有分離性能好、進(jìn)樣量少、靈敏度高等特點(diǎn),已經(jīng)成為化學(xué)、醫(yī)學(xué)、生物、環(huán)境等領(lǐng)域的重要分析手段。 帕金森氏病是一種常見(jiàn)慢性病,但是其確切發(fā)病機(jī)理仍不完全清楚。本論文利用大鼠腦紋狀體立體注射內(nèi)源性神經(jīng)毒素的方

2、法建立帕金森氏病動(dòng)物模型,利用新型化學(xué)修飾電極液相色譜電化學(xué)檢測(cè)器檢測(cè)大鼠紋狀體中各種單胺類神經(jīng)遞質(zhì)含量,通過(guò)遞質(zhì)含量的變化揭示內(nèi)源性神經(jīng)毒素對(duì)帕金森病神經(jīng)系統(tǒng)的損傷機(jī)理,為闡明帕金森氏病的發(fā)病機(jī)理提供重要信息,同時(shí)對(duì)新藥的開(kāi)發(fā)也具有極為重要的意義。論文主要包括以下幾個(gè)方面： 1.乙酰膽堿修飾電極-色譜電化學(xué)檢測(cè)用于內(nèi)源性神經(jīng)毒素對(duì)大鼠腦內(nèi)單胺類神經(jīng)遞質(zhì)影響的研究 本章對(duì)乙酰膽堿(ACh)化學(xué)修飾電極的制備和應(yīng)用進(jìn)行了研

3、究。將其作為高效液相色譜(HPLC)電化學(xué)檢測(cè)器,并與微滲析取樣技術(shù)聯(lián)用,研究了內(nèi)源性神經(jīng)毒素對(duì)大鼠腦紋狀體中單胺類神經(jīng)遞質(zhì)的影響。研究結(jié)果表明該修飾電極對(duì)內(nèi)源性神經(jīng)毒素及單胺類神經(jīng)遞質(zhì)多巴胺(DA)、3,4-二羥苯乙酸(DOPAC)、5-羥色胺(5-HT)和5-羥吲哚乙酸(5-HIAA)具有良好的電催化作用,并且靈敏度高,選擇性好。同時(shí)還利用本方法進(jìn)行了毒素的動(dòng)力學(xué)分析,研究結(jié)果發(fā)現(xiàn)隨著內(nèi)源性神經(jīng)毒素對(duì)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物作用時(shí)間的延長(zhǎng)其腦紋狀體

4、中單胺類神經(jīng)遞質(zhì)的含量有不同的變化,為初步探討帕金森氏病的病理學(xué)、藥理學(xué)研究打下了基礎(chǔ)。 2.尼古丁對(duì)帕金森氏病大鼠紋狀體中多巴胺含量的影響 本章研制了一種鉑/聚乙烯醇化學(xué)修飾電極(CME),將其作為高效液相色譜(HPLC)電化學(xué)檢測(cè)器,并與微滲析取樣技術(shù)聯(lián)用,檢測(cè)N-Methyl-(R)-salsolinol 腦立體定向注射的大鼠紋狀體中多巴胺含量的變化,用于研究尼古丁對(duì)帕金森氏病大鼠紋狀體中多巴胺含量的影響。結(jié)果發(fā)現(xiàn)

5、在造模前腹腔注射尼古丁的大鼠紋狀體中多巴胺含量明顯高于未注射組,表明尼古丁對(duì)N-Methyl-(R)-salsolinol引起的多巴胺含量降低有明顯的改善作用。 3.液相色譜電化學(xué)檢測(cè)技術(shù)用于內(nèi)源性神經(jīng)毒素(R)-Salsolinol和N-Methyl-(R)-salsolinol對(duì)大鼠腦中多巴胺與乙酰膽堿平衡影響的研究 目前關(guān)于帕金森氏病的很多研究都集中于內(nèi)源性神經(jīng)毒素對(duì)多巴胺能神經(jīng)元的損傷,但是最新研究表明,帕金森氏