液相色譜-電化學檢測在內源性神經毒素對帕金森病神經元損傷機理中的應用研究.pdf

1、近年來,隨著生命科學的迅速發(fā)展,對生物樣品信息的準確分析至關重要,但生物樣品成份復雜,含量又往往很低,因此許多傳統(tǒng)的、常規(guī)的分析方法與手段已不能滿足這個領域研究的需要。液相色譜-電化學檢測聯(lián)用技術,作為分析化學的一個分支,由于其具有分離性能好、進樣量少、靈敏度高等特點,已經成為化學、醫(yī)學、生物、環(huán)境等領域的重要分析手段。 帕金森氏病是一種常見慢性病,但是其確切發(fā)病機理仍不完全清楚。本論文利用大鼠腦紋狀體立體注射內源性神經毒素的方

2、法建立帕金森氏病動物模型,利用新型化學修飾電極液相色譜電化學檢測器檢測大鼠紋狀體中各種單胺類神經遞質含量,通過遞質含量的變化揭示內源性神經毒素對帕金森病神經系統(tǒng)的損傷機理,為闡明帕金森氏病的發(fā)病機理提供重要信息,同時對新藥的開發(fā)也具有極為重要的意義。論文主要包括以下幾個方面： 1.乙酰膽堿修飾電極-色譜電化學檢測用于內源性神經毒素對大鼠腦內單胺類神經遞質影響的研究 本章對乙酰膽堿(ACh)化學修飾電極的制備和應用進行了研

3、究。將其作為高效液相色譜(HPLC)電化學檢測器,并與微滲析取樣技術聯(lián)用,研究了內源性神經毒素對大鼠腦紋狀體中單胺類神經遞質的影響。研究結果表明該修飾電極對內源性神經毒素及單胺類神經遞質多巴胺(DA)、3,4-二羥苯乙酸(DOPAC)、5-羥色胺(5-HT)和5-羥吲哚乙酸(5-HIAA)具有良好的電催化作用,并且靈敏度高,選擇性好。同時還利用本方法進行了毒素的動力學分析,研究結果發(fā)現(xiàn)隨著內源性神經毒素對實驗動物作用時間的延長其腦紋狀體

4、中單胺類神經遞質的含量有不同的變化,為初步探討帕金森氏病的病理學、藥理學研究打下了基礎。 2.尼古丁對帕金森氏病大鼠紋狀體中多巴胺含量的影響 本章研制了一種鉑/聚乙烯醇化學修飾電極(CME),將其作為高效液相色譜(HPLC)電化學檢測器,并與微滲析取樣技術聯(lián)用,檢測N-Methyl-(R)-salsolinol 腦立體定向注射的大鼠紋狀體中多巴胺含量的變化,用于研究尼古丁對帕金森氏病大鼠紋狀體中多巴胺含量的影響。結果發(fā)現(xiàn)

5、在造模前腹腔注射尼古丁的大鼠紋狀體中多巴胺含量明顯高于未注射組,表明尼古丁對N-Methyl-(R)-salsolinol引起的多巴胺含量降低有明顯的改善作用。 3.液相色譜電化學檢測技術用于內源性神經毒素(R)-Salsolinol和N-Methyl-(R)-salsolinol對大鼠腦中多巴胺與乙酰膽堿平衡影響的研究 目前關于帕金森氏病的很多研究都集中于內源性神經毒素對多巴胺能神經元的損傷,但是最新研究表明,帕金森氏