尼古丁對帕金森病鼠多巴胺神經(jīng)元損傷的保護(hù)機(jī)制.pdf

1、帕金森病(PD)是多發(fā)于中老年人的神經(jīng)退行性疾病,病理基礎(chǔ)是中腦黑質(zhì)致密部的多巴胺(DA)能神經(jīng)元變性凋亡,多巴胺合成減少。其因為迄今尚未完全明了,臨床上也沒有理想的防治措施。近年,慢性炎癥反應(yīng)被認(rèn)為是PD的主要繼發(fā)病理學(xué)因素,而小膠質(zhì)細(xì)胞(MG)是腦內(nèi)炎癥反應(yīng)的主要參與者。MG通過激活后釋放大量的炎癥細(xì)胞因子和活性氧介導(dǎo)神經(jīng)元的損傷,在PD中起重要促進(jìn)作用。適當(dāng)抑制小膠質(zhì)細(xì)胞的活化能阻止DA神經(jīng)元的進(jìn)行性壞死。
　　 流行病學(xué)

2、調(diào)查顯示,吸煙與PD發(fā)病之間存在著明顯的負(fù)相關(guān)。也有證據(jù)顯示,煙草的主要成分尼古丁(NIC)可以改善PD的臨床表現(xiàn),能夠減少DA神經(jīng)元的丟失。體外實驗證實MG表面表達(dá)有α7型煙堿乙酰膽堿受體(nAChR-α7)并顯示NIC可以與該受體結(jié)合,抑制小膠質(zhì)細(xì)胞的激活,減少炎性因子的釋放,發(fā)揮抗炎和保護(hù)多巴胺神經(jīng)元的作用。然而NIC在體內(nèi)是否通過nAChR-α7發(fā)揮神經(jīng)保護(hù)作用卻鮮有報道。
　　 目的:
　　 本實驗通過觀察NI

3、C及nAChR-α7的阻斷劑-α-銀環(huán)蛇毒素(α-BTX)對脂多糖(LPS)誘導(dǎo)的PD大鼠模型的影響,探討NIC對DA神經(jīng)元的保護(hù)機(jī)制。
　　 方法：
　　 60只Wistar大鼠隨機(jī)分為4組:對照組、模型組、尼古丁組和混合組。每天分別腹腔注射PBS、PBS、NIC、NIC與α-BTX的混合；第14d單側(cè)黑質(zhì)一次性注射PBS、LPS、LPS和LPS;黑質(zhì)注射藥物后2w進(jìn)行阿樸嗎啡誘導(dǎo)的旋轉(zhuǎn)試驗,利用免疫組織化學(xué)觀測各組黑

4、質(zhì)區(qū)酪氨酸羥化酶(TH)免疫陽性神經(jīng)元及離子鈣結(jié)合蛋白1(Iba1)陽性細(xì)胞的形態(tài)和數(shù)量,用免疫組織化學(xué)平均光密度檢測各組黑質(zhì)IL-6,TNF-α,iNOS的表達(dá)水平,并用免疫熒光雙標(biāo)檢測模型組大鼠Iba1陽性細(xì)胞是否表達(dá)這些因子。
　　 結(jié)果：
　　 (1)對照組大鼠未誘導(dǎo)出旋轉(zhuǎn)運動；模型組73.3％大鼠誘導(dǎo)出明顯的旋轉(zhuǎn)運動(154.2±14.9圈/30min),與對照組有顯著差異(P<0.05):尼古丁組20％大鼠誘

5、導(dǎo)出旋轉(zhuǎn)運動(111.7±10.7圈/30min),與模型組相比顯著減弱(P<0.05)；混合組66.7％誘導(dǎo)出旋轉(zhuǎn)運動(145.1±12.7圈/30min),與模型組相比無顯著差異(P>0.05)。
　　 (2)對照組大鼠黑質(zhì)區(qū)TH免疫陽性神經(jīng)元數(shù)量為148.4±9.7個；模型組TH免疫陽性神經(jīng)元數(shù)量(47.0±5.8個)與對照組相比顯著減少(P<0.05)；尼古丁組TH免疫陽性神經(jīng)元數(shù)量(84.4±6.8個)與模型組相比顯著

6、增加(P<0.05)；混合組TH免疫陽性神經(jīng)元數(shù)量(53.0±4.3個)與模型組相比無顯著差異(P>0.05)。
　　 (3)對照組大鼠黑質(zhì)區(qū)Iba1免疫陽性細(xì)胞數(shù)量少(4.4±1.1),有少量的IL-6、TNF-α、iNOS陽性表達(dá)；模型組Iba1免疫陽性細(xì)胞數(shù)量(42.6±3.4)及IL-6、TNF-α、iNOS的表達(dá)量與對照組相比均顯著增多(P<0.05):尼古丁組Iba1免疫陽性細(xì)胞數(shù)量(14.4±3.2)及IL-6、T