黃連上清丸的藥代動(dòng)力學(xué)及血清藥物化學(xué)研究.pdf

1、黃連上清丸是由黃連、黃芩、黃柏、大黃等十七種藥材制成的中藥復(fù)方制劑，收錄于《國(guó)家基本中成藥》及2010版中華人民共和國(guó)藥典，具有清熱、止痛等作用，至今已沿用近500年。但其體內(nèi)藥動(dòng)學(xué)行為及作用物質(zhì)基礎(chǔ)仍不明確，且未見關(guān)于黃連上清丸藥代動(dòng)力學(xué)及血清藥物化學(xué)研究的任何報(bào)道。本論文同時(shí)對(duì)黃連上清丸中蘆薈大黃素和大黃酸進(jìn)行了含量測(cè)定，用以評(píng)價(jià)市場(chǎng)上黃連上清丸的質(zhì)量，并首次對(duì)其進(jìn)行了大鼠體內(nèi)的藥代動(dòng)力學(xué)及血清藥物化學(xué)研究，有助于闡明作用機(jī)制，明確

2、藥效物質(zhì)基礎(chǔ)。
　　1、建立了一種新的HPLC法同時(shí)測(cè)定黃連上清丸中蘆薈大黃素及大黃酸的含量，并將其應(yīng)用于不同廠家不同批次的產(chǎn)品。色譜柱為Inertsil?ODS-3(4.6mm×150mm,5μm)，流動(dòng)相為甲醇-0.2％磷酸（65:35），流速1.0ml/min，檢測(cè)波長(zhǎng)254nm，柱溫25℃，進(jìn)樣量10μl。此條件下，蘆薈大黃素、大黃酸在8.14-41.40μg/ml（r=0.9999）、6.49-29.70μg/ml（r=

3、0.9998）濃度范圍內(nèi)線性關(guān)系良好。且方法專屬性、重復(fù)性、儀器精密度、加樣回收率、穩(wěn)定性均符合測(cè)定要求。結(jié)果顯示部分不同廠家及同一廠家不同批號(hào)間黃連上清丸中蘆薈大黃素和大黃酸的含量有明顯上下浮動(dòng)趨勢(shì)。
　　2、首次建立了HPLC-DAD法測(cè)定黃連上清丸中大黃酸在大鼠血漿中的濃度，并研究其藥動(dòng)學(xué)過程。色譜柱為Inertsil?ODS-3(150mm×4.6mm,5um)，流動(dòng)相為甲醇-0.2%磷酸（80:20）。內(nèi)標(biāo)為1，8-二羥

4、基蒽醌。檢測(cè)波長(zhǎng)254nm，流速1.0ml/min，柱溫25℃，進(jìn)樣量10μl。結(jié)果表明，在0.05-5μg/ml血藥濃度范圍內(nèi)，大黃酸呈良好的線性關(guān)系（r=0.9981）。高、中、低濃度下，日內(nèi)精密度均小于11.9%，日間精密度均小于14.7%；提取回收率為86.5%-106.3%。一定濃度下，內(nèi)標(biāo)提取回收率為91.2%。RSD均小于15%。藥動(dòng)學(xué)結(jié)果顯示，一定劑量下，黃連上清丸中大黃酸在體內(nèi)呈二室開放模型，達(dá)峰時(shí)間為0.222h，達(dá)

5、峰濃度為0.219μg/ml。
　　3、首次利用LC-Q-TOF/MS技術(shù)對(duì)黃連上清丸進(jìn)行血清藥物化學(xué)研究。體外檢測(cè)到黃連上清丸中46個(gè)化學(xué)成分，鑒定了其中27個(gè)，比較給藥前后大鼠血清MS及MS/MS圖，及其與體外化學(xué)成分的差異。尋找到來源于黃連上清丸的原型成分15個(gè)，鑒定了其中10個(gè)，發(fā)現(xiàn)代謝產(chǎn)物21個(gè)，鑒定了其中8個(gè)。結(jié)果顯示黃連上清丸主要有效成分小檗堿、大黃酸、黃芩苷、大黃素等均以原型入血，部分地揭示了黃連上清丸的藥效物質(zhì)基