部分去背根后脊髓內(nèi)Sema3A、NP-1及備用背根節(jié)內(nèi)NP-1表達(dá)的變化.pdf

1、目的：觀察在貓部分去背根后，神經(jīng)生長(zhǎng)抑制因子Sema3A在脊髓內(nèi)表達(dá)的時(shí)空變化以及其受體neuropilin-1(NP-1)在脊髓、背根節(jié)表達(dá)的時(shí)空變化，以初步探討神經(jīng)生長(zhǎng)抑制因子與脊髓可塑性的關(guān)系。 方法：成年健康雄貓15只分為三組：正常組、手術(shù)7天組、手術(shù)14天組，每組5只動(dòng)物。手術(shù)組建立單側(cè)備用背根模型(即切斷一側(cè)L<,1>-L<,5>，L<,7>-S<,2>背根，保留L<,6>背根為備用根)，分別于術(shù)后7天，14天處死。

2、取各組L<,3>、L<,5>、L<,6>脊髓節(jié)段及一側(cè)L<,6>背根節(jié)(正常組取任意一側(cè)背根節(jié)，手術(shù)組取手術(shù)側(cè)背根節(jié))，在-20℃恒冷箱切片，脊髓橫切，片厚35μm；背根節(jié)縱切，片厚20μm。脊髓用羊抗Sema3A(1:1600)抗體，及羊抗NP-1抗體(1:500)；背根節(jié)用羊抗NP-1抗體(1:600)進(jìn)行免疫組織化學(xué)染色，并設(shè)置空白對(duì)照及置換對(duì)照。光鏡下觀察結(jié)果，并采用圖像分析系統(tǒng)測(cè)量各組Sema3A及NP-1免疫陽(yáng)性產(chǎn)物在L<,

3、3>、L<,5>、L<,6>脊髓背角淺層的平均光密度值(正常組測(cè)任意一側(cè)，手術(shù)組測(cè)手術(shù)側(cè))；計(jì)數(shù)L<,6>背根節(jié)NP-1陽(yáng)性中小神經(jīng)元數(shù)。結(jié)果采用單因素方差分析及q檢驗(yàn)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析，若P

4、ma3A、NP-1的免疫陽(yáng)性產(chǎn)物主要分布于背角淺層的神經(jīng)元及神經(jīng)氈內(nèi)。它們的平均OD值在L<,3>脊髓節(jié)段于手術(shù)7天較正常組有所下降(P<0.05)，手術(shù)14天維持在這一水平(P>0.05)；在L<,5>脊髓節(jié)段于手術(shù)7天下降(P<0.05)，手術(shù)14天升高并接近正常組(P>0.05)；在L<,6>脊髓背角各時(shí)間段均無(wú)顯著差異(P>0.05)。 2．單側(cè)部分去背根后NP-l在L<,6>背根節(jié)表達(dá)的變化 L<,6>

5、背根節(jié)內(nèi)NP-1的免疫陽(yáng)性產(chǎn)物分布于部分中、小神經(jīng)元的胞漿中，在少量的大神經(jīng)元胞漿中也有分布。另外，能夠觀察到陽(yáng)性神經(jīng)纖維。手術(shù)側(cè)L<,6>背根節(jié)NP-l陽(yáng)性中小神經(jīng)元數(shù)在手術(shù)7天組較正常組減少(P<0.05)；在手術(shù)14天組較7天組有所增加。 結(jié)論： 脊髓部分去傳入后7天、14天，Sema3A及其受體NP-1的表達(dá)在L<,3>脊髓背角淺層較正常組下調(diào)并維持在低水平；在L<,5>脊髓經(jīng)歷了先下調(diào)后上調(diào)的過程；在L<