針刺對神經(jīng)生長因子在脊髓及備用背根節(jié)內(nèi)表達(dá)影響的初步研究.pdf

1、目的：探討部分去背根及針刺后不同時(shí)相脊髓和背根節(jié)(DRG)神經(jīng)生長因子(nerve growth factor，NGF) 的表達(dá)變化，藉以了解針刺后脊髓和背根節(jié)內(nèi)NGF表達(dá)變化與脊髓可塑性的關(guān)系。 方法：將20只成年健康貓和20只SD大鼠建立雙側(cè)部分去背根模型，并分別隨機(jī)分為正常對照組，雙側(cè)部分背根切斷3天、7天及14天組，每組5只。模型建立按照文獻(xiàn)操作[7]，2％戊巴比妥鈉(2.6mg /k g)腹膜腔注射麻醉后行雙側(cè)備用根手

2、術(shù)，即貓：切除雙側(cè)L1～L5、L7～S2 DRG，保留雙側(cè)L6DRG 為備用背根；大鼠：切除雙側(cè)L1～L4、L6～S2 DRG，保留雙側(cè)L5DRG 為備用背根。術(shù)后隨機(jī)對一側(cè)L6及L5脊神經(jīng)外周支分布區(qū)的兩組穴位(足三里和懸鐘、伏兔和三陰交)進(jìn)行針刺。應(yīng)用G66805-1A型袖珍穴位診療儀(上海華誼醫(yī)用儀器有限公司)，以兩根1寸毫針作為正負(fù)極電針分別刺入同組穴位中的兩穴，針刺30min (頻率98 次/min，15min后交換電極)，次

3、日換另一組穴位，兩組穴位交替進(jìn)行。分別于針刺第3天、7天、14天后取材，將大鼠和貓的脊髓及備用背根節(jié)組織分別應(yīng)用免疫組織化學(xué)和Western-blot實(shí)驗(yàn)方法檢測神經(jīng)生長因(NGF)蛋白表達(dá)變化，應(yīng)用圖象分析系統(tǒng)和凝膠分析系統(tǒng)計(jì)算陽性結(jié)果相對積分吸光度值。 結(jié)果： 1．(1)免疫組織化學(xué)檢測NGF在大鼠脊髓和備用DRG組織中的表達(dá)，鏡下結(jié)果顯示脊髓后角Ⅱ板層、背核、DRG中均存在數(shù)量不等的NGF陽性神經(jīng)元；其NGF陽性神

4、經(jīng)元胞漿、胞核均著色，但胞核染色較深；(2)7天、14天組針刺側(cè)備用DRG中NGF蛋白表達(dá)的積分光密度值較非針刺側(cè)升高，差異有顯著性(P<0．05)，且3天、7天、14天組針刺側(cè)備用DRG中NGF蛋白表達(dá)的積分光密度值隨時(shí)間推移依次顯著升高(P<0．05)，且7天、14天組雙側(cè)備用DRG中NGF蛋白表達(dá)的積分光密度值均顯著高于正常對照組(P<0．05)； (3)而脊髓Ⅱ板層、背核中NGF蛋白表達(dá)的積分光密度值針刺側(cè)與非針刺側(cè)顯著升高，且

5、均高于正常對照組，差異均有顯著性(P<0．05)，但針刺側(cè)與非針刺側(cè)及各組間無顯著性差異(P>0．05)。 2. (1) Western-blot檢測NGF：在貓脊髓后角和備用DRG組織中存在NGF蛋白的表達(dá)；(2)在DRG中：針刺3天組，針刺側(cè)和非針刺側(cè)及正常對照組三者之間NGF蛋白表達(dá)量差異無顯著性意義(P>0.05)；(3) 針刺7天組，針刺側(cè)DRG內(nèi)NGF蛋白表達(dá)量顯著高于非針刺側(cè)(P<0.05)，且高于3天組針刺側(cè)與非

6、針刺側(cè)(P<0.05)，而7天組非針刺側(cè)DRG內(nèi)NGF蛋白表達(dá)量高于3天組非針刺側(cè)(P<0.05)，且高于正常對照組(P<0.05)；(4)針刺14天組，針刺側(cè)DRG內(nèi)NGF蛋白表達(dá)量顯著高于非針刺側(cè)(P<0.05)，且高于7天組針刺側(cè)與非針刺側(cè)(P<0.05)；14天組非針刺側(cè)DRG 內(nèi)NGF蛋白表達(dá)量高于7天組非針刺側(cè)(P<0.05)，差異有顯著性。(5) 在脊髓后角中：NGF蛋白表達(dá)量在各組中針刺側(cè)與非針刺側(cè)無顯著性差異(P>0.