聚乙二醇干擾素α-2a對慢乙肝患者肝組織中Th17細胞及HBVcccDNA的影響.pdf

1、目的：
　　通過研究Th17細胞及其細胞因子在慢性乙型肝炎（CHB）患者肝組織及外周血的的表達情況，探討Th17細胞與CHB患者肝組織HBV DNA、HBVcccDNA、肝功能、及肝組織病理的關(guān)系；通過研究聚乙二醇干擾素α-2a對CHB患者外周血Th17細胞因子、肝組織中的IL-17+細胞及IL-17R+細胞以及對肝組織HBV DNA、HBVcccDN的影響和臨床效果。探討聚乙二醇干擾素α-2a在抗病毒的過程中是否也通過影響IL-

2、17的表達，而達到免疫調(diào)節(jié)的作用。
　　方法：
　　①選擇2011年2月至2013年6月HBeAg陽性的慢性乙型肝炎患者30例為研究對象，這些患者都在我科門診及住院部接受了正規(guī)的治療，年齡16-60歲，平均年齡(35.39±10.14)歲；
　?、谒谢颊呔捎肞EG-IFNα-2a180μg皮下注射，每周1次，療程48周，隨訪24周；其中22例患者行治療前后的肝組織穿刺病理活檢。
　?、鄄捎肊LISA法檢測外周

3、血IL-17基線水平及治療24周、48周外周血IL-17的水平；用免疫組化法檢測CHB患者肝細胞中Th17細胞相關(guān)IL-17+細胞、IL-17R+細胞的表達狀況；通過實時的熒光定量的聚合酶鏈反應(yīng)（FQ-PCR）方法，測定了我們收集了的活體的肝組織中的HBV cccDNA及HBV DNA含量；我們同時也對其進行了一下常規(guī)病理染色，用來判定其的S(纖維化)及G(炎癥)發(fā)展的程度；并在每12周檢測肝腎功、血清HBV DNA、尿常規(guī)、血常規(guī)及乙

4、肝五項等相關(guān)臨床指標。
　?、苡肧PSS17.0軟件統(tǒng)計分析病例的一般資料、外周血Th17細胞因子、肝組織中的IL-17+細胞及IL-17R+細胞、血清HBV DNA、谷氨酸氨基轉(zhuǎn)氨酶ALT、肝組織炎癥、纖維化程度、肝組織HBV cccDNA及HBV DNA的變化的相關(guān)性。另選取30例健康志愿者作為對照組。
　　結(jié)果：
　　一、治療前的結(jié)果
　　1.CHB患者外周血IL-17(pg/mL)的基線水平顯著高于正常對

5、照組（P<0.05），外周血IL-17的基線水平與ALT（U/L）呈正相關(guān)（r=0.935，P<0.05），與外周血 HBV DNA(lgIU/ml)、肝組織HBV DNA(lgIU/mL)及HBV cccDNA(lgcps/mg)均無明顯相關(guān)（r分別為-0.10、-0.332、0.101，三者均為P>0.05）。與肝組織炎癥分級顯著相關(guān)（r=0.431,P<0.05），與肝組織纖維化分期無明顯相關(guān)（r=0.194, P>0.05）；<

6、br>　　2.外周血IL-17基線水平與肝組織中的IL-17R+細胞表達呈正相關(guān)（r=0.659,P<0.05）；與肝組織中的IL-17+細胞表達無明顯相關(guān)（r=0.299，P>0.05）；
　　3．CHB患者肝組織中IL-17+細胞比例（0.19±0.07）較正常對照組（0.009±0.002）明顯升高，IL-17R+細胞比例（0.14±0.05）較正常對照組（0.004±0.0005）明顯升高，差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P<0.05）

7、。肝組織中的IL-17+細胞表達與肝組織中的IL-17R+細胞表達之間亦呈正相關(guān)（r=0.637,P<0.05），肝組織中IL-17+細胞表達與病理炎癥分級(G)及纖維化分期（S）呈正相關(guān)（r分別為0.461、0.563，P值均<0.05），肝組織中IL-17R+細胞表達與病理炎癥分級(G)及纖維化分期（S）呈正相關(guān)（r分別為0.434、0.601，P值均<0.05）；
　　二、治療后的結(jié)果
　　1.30例HBeAg陽性的C

8、HB患者經(jīng)聚乙二醇干擾素抗病毒治療48周后，其中有26例ALT恢復(fù)正常，復(fù)常率為86.67%；血清HBV DNA轉(zhuǎn)陰19例，清除率為63.33%；發(fā)生HBeAg/抗-HBe血清學(xué)上清除的7例，清除率為23.33%；經(jīng)聚乙二醇干擾素治療以后，肝組織中的炎癥的級別與治療前的結(jié)果相比較下降幅度較大，有統(tǒng)計學(xué)差異（P<0.05）；其纖維化分期較前有所改善，（P>0.05）無統(tǒng)計學(xué)意義；22例CHB病患治療前我們行肝穿刺后的肝組織中的HBV DN

9、A水平是7.12±0.96log10，HBV cccDNA是5.39±1.161 log10，治療后肝組織HBV DNA水平是6.99±1.7log10，HBV cccDNA是4.96±1.18log10，兩者相比較均有所降低，但無明顯的統(tǒng)計學(xué)差異（P>0.05）;
　　2.①30例HBeAg陽性的CHB患者經(jīng)聚乙二醇干擾素抗病毒治療過程中各時間點外周血IL-17水平的變化趨勢：在治療24周，外周血IL-17水平呈下降趨勢，與治療

10、前基線相比較差異尤為明顯（P<0.01），至48周時仍有所下降，但與24周時的外周血IL-17水平相比較，差異不是很明顯，但仍有統(tǒng)計學(xué)意義（P<0.05），其48周檢測外周血IL-17水平仍高于正常對照組；
　?、诎l(fā)生HBeAg/抗-HBe血清轉(zhuǎn)換CHB患者的外周血IL-17的基線水平高于 HBeAg/抗-HBe血清未轉(zhuǎn)換組，但差異無統(tǒng)計學(xué)意義（P>0.05）；
　?、墼诟蓴_素治療過程中，其中發(fā)生 HBeAg/抗-HBe血清

11、轉(zhuǎn)換組在24周、48周時的外周血IL-17水平下降均明顯，差異亦均有統(tǒng)計學(xué)意義（P<0.05），其中治療24周時的水平較基線相比較差異更為明顯（P<0.01）；而HBeAg/抗-HBe血清未轉(zhuǎn)換組在24周、48周時的外周血IL-17水平亦有所下降，但24周的IL-17水平與48周的IL-17水平相比較，差異無統(tǒng)計學(xué)意義（P>0.05）;
　　3.①聚乙二醇干擾素α-2a治療CHB患者48周后，肝組織中IL-17/IL-17R細胞表

12、達均有所降低，差異比較有統(tǒng)計學(xué)意義（P<0.05）；
　　②抗病毒治療48周后，肝組織中的IL-17+細胞表達在HBeAg/抗-HBe血清轉(zhuǎn)換組和HBeAg/抗-HBe血清未轉(zhuǎn)換組有所降低，HBeAg/抗-HBe血清轉(zhuǎn)換組組內(nèi)比較有統(tǒng)計學(xué)差異（P<0.05），但HBeAg/抗-HBe血清轉(zhuǎn)換組和HBeAg/抗-HBe血清未轉(zhuǎn)換組比較無統(tǒng)計學(xué)意義（P>0.05）；
　?、劭共《局委?8周后，肝組織中的IL-17R+細胞表達在H

13、BeAg/抗-HBe血清轉(zhuǎn)換組和HBeAg/抗-HBe血清未轉(zhuǎn)換組有所降低，發(fā)生HBeAg/抗-HBe血清轉(zhuǎn)換組治療48周后，差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P<0.05），但沒有發(fā)生HBeAg/抗-HBe血清清除組經(jīng)治療48周后，差異無統(tǒng)計學(xué)意義（P>0.05），且HBeAg/抗-HBe血清轉(zhuǎn)換組和HBeAg/抗-HBe血清未轉(zhuǎn)換組比較也無統(tǒng)計學(xué)意義（P>0.05）。
　　結(jié)論
　　①HBeAg陽性的CHB患者Th17細胞及其細胞因子，