含PML-RARa與ABL雙基因質(zhì)粒標(biāo)準(zhǔn)品的制備及檢測PML-RARa基因的雙重?zé)晒舛縋CR方法的建立.pdf

1、研究目的：
　　 1.獲得穩(wěn)定，準(zhǔn)確的含PML/RARa和ABL雙基因質(zhì)粒標(biāo)準(zhǔn)品。
　　 2.建立檢測PML/RARa和ABL基因雙重?zé)晒舛縋CR方法。
　　 3.開發(fā)出可應(yīng)用于臨床急性早幼粒白血病病人PML/RARa基因檢測試劑盒。
　　 方法：
　　 1.利用RT-PCR從NB4細(xì)胞中擴增出ABL基因克隆至質(zhì)粒PCMV4-PML/RARa中(該質(zhì)粒由上海交通大學(xué)血液學(xué)研究所張小偉博士惠贈)送

2、去測序。測序正確后，將重組質(zhì)粒命名為PCMV4-PML/RARa-ABL，并對質(zhì)粒穩(wěn)定性和反應(yīng)性能進(jìn)行評價。
　　 2.構(gòu)建穩(wěn)定的檢測PML/RARa和ABL基因的單重?zé)晒舛縋CR反應(yīng)體系，同時在此基礎(chǔ)之上建立穩(wěn)定雙重?zé)晒舛縋CR方法，開發(fā)出可應(yīng)用于臨床檢測白血病病人PML/RARa檢測的試劑盒。
　　 實驗結(jié)果：
　　 1.成功構(gòu)建了含PML/RARa和ABL雙基因質(zhì)粒標(biāo)準(zhǔn)品，用于白血病病人PML/RARa