帶蒂壁層腹膜瓣翻轉(zhuǎn)修補(bǔ)肝外膽管損傷的實(shí)驗(yàn)研究.pdf

1、目的：本動(dòng)物實(shí)驗(yàn)通過(guò)帶蒂壁層腹膜瓣翻轉(zhuǎn)修補(bǔ)肝外膽管損傷，觀察自體帶蒂壁層腹膜修復(fù)肝外膽管的組織形態(tài)學(xué)及不同組織的相容性變化。探討自體帶蒂壁層腹膜瓣修補(bǔ)肝外膽管損傷的可行性，為臨床膽管損傷處理探索新的手術(shù)方式。 方法：選擇20只健康雄性日本大耳兔，體重2.2～2.5kg，制作實(shí)驗(yàn)?zāi)Ｐ?。分兩個(gè)階段：第一階段，經(jīng)開(kāi)腹手術(shù)，常規(guī)行膽囊切除術(shù)及膽管結(jié)扎造成不全梗阻后，關(guān)腹；第二階段，膽管不全梗阻后第3天，再次開(kāi)腹手術(shù)切除部分膽管管壁，長(zhǎng)度

2、約0.5～0.8cm，寬約周徑的1/3～2/3，模擬人體建立膽總管缺損模型。在膽總管損傷右外側(cè)水平,即時(shí)分離一適當(dāng)長(zhǎng)度，寬度稍大于膽總管缺損的壁層腹膜瓣，血管蒂保留在近膽管側(cè)，翻轉(zhuǎn)腹膜，漿膜面對(duì)膽管腔，連續(xù)縫合于膽管缺損邊緣。術(shù)中及術(shù)后第一天給予靜滴青霉素鈉20萬(wàn)單位，預(yù)防感染。 術(shù)后觀察實(shí)驗(yàn)動(dòng)物活動(dòng)、飲食、鞏膜有無(wú)黃染及二便等一般情況。分別于首次手術(shù)前，膽總管不全梗阻后3天，膽總管缺損修復(fù)術(shù)后7、15、30及80d在空腹情況下

3、經(jīng)耳緣靜脈采血2.5ml測(cè)總膽紅素(TBiL)直接膽紅素(DTiL)總膽汁酸(TBA)、天門(mén)冬氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶(AST)和丙氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶(ALT)。 于修復(fù)術(shù)后1、2、3、5和12w分別取4只實(shí)驗(yàn)兔，切取修復(fù)區(qū)膽管、蒂腹膜及肝組織行HE光鏡檢查及修復(fù)段膽管行免疫組化檢查，觀察局部組織的愈合、成纖維細(xì)胞、免疫細(xì)胞、膽管黏膜與植被的腹膜的相容性及TGF-β1的表達(dá)情況。 結(jié)果：動(dòng)物存活情況：2只實(shí)驗(yàn)兔分別于修復(fù)術(shù)后第9d和第

4、15d死亡，其余18只實(shí)驗(yàn)兔均健康存活。 血生化指標(biāo)監(jiān)測(cè)：AST及ALT術(shù)前正常值為25.65±1.30U/L、44.58±3.37U/L，在膽總管不全梗阻3d后，AST及ALT分別為33.58±2.76U/L，58.23±6.30U/L，經(jīng)t檢驗(yàn)，差異有顯著性。在修復(fù)術(shù)后第7天，AST及ALT分別為24.20±1.59U/L、43.93±3.98U/L，與術(shù)前相比，經(jīng)t檢驗(yàn)，無(wú)顯著性差異。膽總管不全梗阻3d后TBiL，DTiL

5、及TBA分別為14.8±2.62umol/L5.58±0.57 umol/L、4.93±0.76umol/L，與術(shù)前(5.45±1.39umol/L、1.65±0.39umol/L、2.25±0.42umol/L)相比，經(jīng)t檢驗(yàn)，差異有顯著性。在修復(fù)術(shù)后第7d，數(shù)值均明顯下降，與膽管不全梗阻3d后的指標(biāo)相比，經(jīng)t檢驗(yàn)，差異有顯著性。與術(shù)前正常指標(biāo)相比，經(jīng)t檢驗(yàn)，差異無(wú)顯著性。在修復(fù)術(shù)后期，各血清生化指標(biāo)無(wú)明顯變化，保持在正常范圍。

6、 標(biāo)本大體觀察：修復(fù)后2w，膽管修補(bǔ)段被鄰近大網(wǎng)膜和纖維組織包裹，膽管缺損腹膜修補(bǔ)處腹膜片仍清晰可見(jiàn)，其腔面染有膽汁，修復(fù)區(qū)近段膽管輕度水腫，無(wú)再明顯擴(kuò)張。修復(fù)術(shù)后5w，蒂腹膜被增生結(jié)締組織包裹與周?chē)M織粘連緊密，修復(fù)段移植腹膜片隱約可見(jiàn)，腔膜面只能憑中央凹陷區(qū)確認(rèn)，周邊為移行過(guò)來(lái)的膽管黏膜。修復(fù)術(shù)后12w，修復(fù)區(qū)除了縫線存留外，移植腹膜片已難以辨認(rèn)，其腔面被膽管黏膜覆蓋，表面光滑無(wú)隆起，修復(fù)段膽管質(zhì)地柔韌，管腔無(wú)狹窄。探查肝臟表面光

7、滑，質(zhì)韌。 光鏡觀察：修復(fù)術(shù)后第1w，肝組織，肝細(xì)胞周?chē)梢?jiàn)少量炎性細(xì)胞浸潤(rùn)，肝細(xì)胞輕度腫脹。修復(fù)術(shù)后第2w，肝細(xì)胞腫脹明顯減輕，周?chē)仔约?xì)胞浸潤(rùn)明顯減少。膽管缺損邊緣與腹膜間已有纖維隆連接，腹膜邊緣可見(jiàn)膽管上皮生長(zhǎng)趨勢(shì)，并有巨噬細(xì)胞、組織細(xì)胞、成纖維細(xì)胞及多型核白細(xì)胞浸潤(rùn)。 修復(fù)術(shù)后第3w，肝細(xì)胞結(jié)構(gòu)逐漸恢復(fù)正常，毛細(xì)膽管及枯否細(xì)胞內(nèi)未見(jiàn)膽紅素積聚。移植腹膜腔面有單層柱狀上皮向心性生長(zhǎng)趨勢(shì)。腹膜片中外層主要為增生纖維組

8、織，散在淋巴細(xì)胞、漿細(xì)胞、成纖維細(xì)胞和少量巨噬細(xì)胞，部分有毛細(xì)血管。 修復(fù)術(shù)后第5w，移植腹膜補(bǔ)片大部分腔面覆蓋著單層柱狀上皮和腺體，中外層為增生纖維組織和平滑肌組織，仍散在有淋巴細(xì)胞、漿細(xì)胞、成纖維細(xì)胞和巨噬細(xì)胞，并見(jiàn)較完整的毛細(xì)血管。 修復(fù)術(shù)后第12w，移植腹膜幾乎完全為膠原纖維所代替，腔面完全為單層柱狀上皮和腺體所覆蓋，中外層纖維組織排列致密。 修復(fù)區(qū)膽管組織TGF-β1表達(dá)情況:TGF-β1在修復(fù)術(shù)后2周

9、w表達(dá)+++，陽(yáng)性細(xì)胞數(shù)63.8±5.2，與正常膽管(陽(yáng)性細(xì)胞數(shù):17.8±3.9)相比，差異有顯著性。5w表達(dá)++，陽(yáng)性細(xì)胞數(shù)40.5±6.1，與正常膽管相比，差異有顯著性變。12w表達(dá)+，陽(yáng)性細(xì)胞數(shù)18.3±2.7，與正常膽管相比差異無(wú)顯著性。 結(jié)論:實(shí)驗(yàn)結(jié)果證實(shí)帶蒂壁層腹膜翻轉(zhuǎn)后，與膽管壁漿膜的連續(xù)薄層縫合，腹膜的成活率高，易位適應(yīng)能力強(qiáng)。經(jīng)組織微檢結(jié)果顯示，與膽管黏膜的相容性和適應(yīng)性良好，膽管黏膜上皮可逐漸由四周向心性植