抗腫瘤硫色滿酮衍生物的可能作用靶點(diǎn)—微管蛋白和Toll樣受體.pdf

1、微管是細(xì)胞骨架的主要組成成分,在維持細(xì)胞形態(tài)和細(xì)胞有絲分裂中起著至關(guān)重要的作用。尤其是在細(xì)胞的有絲分裂過(guò)程中,當(dāng)細(xì)胞進(jìn)入分裂期后,由微管解聚成的微管蛋白參與紡錘體的裝配。任何干擾微管蛋白聚合和解聚功能活性的藥物都會(huì)妨礙細(xì)胞周期,從而引起細(xì)胞的凋亡。因此以微管為作用靶點(diǎn)一直是抗癌藥物研究的熱點(diǎn)。
　　Toll樣受體(TLR)是一類模式識(shí)別受體,通過(guò)多種信號(hào)傳遞改善免疫系統(tǒng)功能,活化 NF-κB信號(hào)通路,調(diào)節(jié) TNF-α、ILs和IF

2、N-α等多種細(xì)胞因子分泌。已證實(shí)幾種TLRs的激動(dòng)劑具有抗腫瘤作用,如imiquimod,resiquimod。
　　本文將通過(guò)兩個(gè)途徑對(duì)新型的硫色滿酮類化合物的抗腫瘤作用靶點(diǎn)進(jìn)行探討,一方面以微管為作用靶點(diǎn)進(jìn)行研究,另一方面以TLRs激動(dòng)劑效應(yīng)為出發(fā)點(diǎn)進(jìn)行探討。
　　首先從豬腦組織中純化出微管蛋白,并采用 BCA法檢測(cè)微管蛋白的初始濃度,然后用SDS-PAGE電泳法對(duì)其進(jìn)行鑒定,再通過(guò)濁度法和電鏡超微結(jié)構(gòu)觀察法兩種方法綜合

3、評(píng)價(jià)提取的微管蛋白的聚合-解聚的功能活性,同時(shí)以典型的微管抑制劑紫杉醇和秋水仙堿作為陽(yáng)性對(duì)照藥物證明了提取出的微管蛋白的功能活性良好。本研究發(fā)現(xiàn)(z)-3-(氯代亞甲基)-6-甲基-硫色滿-4-酮(CMMT)、(z)-3-(氯代亞甲基)-6-氟-硫色滿-4-酮(CMFT)、(z)-3-(氯代亞甲基)-6-氯-硫色滿-4-酮(CMCT)、(z)-3-(溴代亞甲基)-6-氟-硫色滿-4-酮(BMFT)和(z)-3-(氯代亞甲基)-6-甲氧基

4、-硫色滿-4-酮(CMMOT)都能夠抑制微管蛋白的聚合。探討此類化合物是否具有TLRs激動(dòng)劑作用的實(shí)驗(yàn)證實(shí)CMFT具有類LPS作用,可激活小鼠腹腔巨噬細(xì)胞,提高分泌TNF-α、IL-6和IL-12水平,提示其可能是TLRs的激動(dòng)劑。
　　本研究表明,類似化學(xué)結(jié)構(gòu)的CMMT、CMFT、CMCT、BMFT和CMMOT有著同秋水仙堿相似的作用都能夠抑制微管蛋白的聚合;CMFT可能是TLRs的激動(dòng)劑,具有類LPS作用,能顯著提高小鼠腹腔巨