烏司他丁預(yù)防裸鼠結(jié)腸癌肝轉(zhuǎn)移模型部分肝切除術(shù)后復(fù)發(fā)的研究.pdf

1、目的：烏司他丁的藥用機(jī)理可以分為抑制酶的活性和抗炎的效應(yīng)，作為尿激酶抑制劑（UI）的類似物，能有效抑制各種酶的活性，關(guān)于這一獨(dú)特的藥理學(xué)性質(zhì)，目前仍未引起足夠的重視。結(jié)腸癌肝轉(zhuǎn)移部分肝切除術(shù)后仍有較高的復(fù)發(fā)率。手術(shù)誘導(dǎo)肝細(xì)胞再生是刺激肝內(nèi)微小轉(zhuǎn)移灶進(jìn)展的機(jī)制之一，基質(zhì)金屬蛋白酶-9（MMP-9）是參與晚期階段肝臟實(shí)質(zhì)性細(xì)胞再生的一重要因子，也是細(xì)胞外基質(zhì)降解的主要成分。MMP-9的激活可以被烏司他丁的抗纖溶酶活性而抑制。本研究擬通過(guò)動(dòng)物

2、實(shí)驗(yàn)，評(píng)估烏司他丁在預(yù)防結(jié)腸癌肝轉(zhuǎn)移切除術(shù)后復(fù)發(fā)的臨床應(yīng)用，拓展其在預(yù)防腫瘤復(fù)發(fā)方面的臨床應(yīng)用，并探討其機(jī)制，為指導(dǎo)烏司他丁的臨床應(yīng)用提供可靠的藥理學(xué)依據(jù)及最佳用藥時(shí)機(jī)，為干預(yù)結(jié)腸癌肝轉(zhuǎn)移術(shù)后復(fù)發(fā)提供有效的治療手段及合理治療方案。
　　方法：取人類結(jié)腸癌HCT116細(xì)胞常規(guī)培養(yǎng)、傳代并最終調(diào)整濃度為2*107/ml的單細(xì)胞懸液；1％戊巴比妥鈉腹腔內(nèi)注射麻醉，并固定裸鼠；開腹經(jīng)脾臟包膜下注入6周齡的BALB/C-nu品系雄性裸鼠，關(guān)

3、腹；14天后取仰臥位再次開腹行肝左葉切除，關(guān)腹；結(jié)腸癌肝轉(zhuǎn)移模型建立后隨機(jī)分成3組，每組12只：烏司他丁早期治療組：肝左葉切除術(shù)后立即予烏司他丁治療，連續(xù)用藥一周。烏司他丁晚期治療組：肝左葉切除術(shù)后一周開始予烏司他丁治療，連續(xù)用藥一周。陰性對(duì)照組：安慰劑（0.9%生理鹽水）治療組。部分肝（肝左葉）切除術(shù)后21天處死裸鼠，取肝組織行HE染色鑒定有無(wú)肝癌，免疫組化檢測(cè)MMP-9在肝腫瘤組織中的含量。
　　結(jié)果：
　　1.全部36

4、例實(shí)驗(yàn)動(dòng)物，處死后肉眼均可見肝內(nèi)有黃白色結(jié)節(jié)，結(jié)節(jié)型肝癌有11例（30.56%），彌漫性肝癌有15例（41.66%），混合型肝癌10例（27.78%）（如圖1所示）；
　　2.全部36例實(shí)驗(yàn)動(dòng)物肝腫瘤組織標(biāo)本經(jīng)HE染色后鑒定均為繼發(fā)性肝癌（如圖2所示）。
　　3.烏司他丁早期治療組（1.898±0.342）腫瘤內(nèi)的MMP-9水平顯著低于陰性對(duì)照組（2.775±0.094）（如表3所示：F=73.318，p=0<0.01）

5、r>　　4.陰性對(duì)照組（2.775±0.094）腫瘤內(nèi)的MMP-9水平顯著高于晚期治療組（1.079±0.345）（如表4所示：F=269.547，p=0<0.01）
　　5.烏司他丁早期治療組（1.898±0.342）腫瘤內(nèi)的MMP-9水平顯著高于晚期治療組（1.079±0.345）（如表5所示：F=34.12，p=0<0.01）
　　6.陰性對(duì)照組中，未經(jīng)烏司他丁處理的肝癌組織中MMP-9（2.775±0.094）高表達(dá)